促紅細(xì)胞生成素對(duì)離體帕金森病模型黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分重組人促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元生存預(yù)后的影響 目的: 研究重組人促紅細(xì)胞生成素（recombinant human erythropoietin，rhEPO）預(yù)處理對(duì)帕金森病模型中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元生存預(yù)后的影響。 方法：健康SD大鼠分為五組：空白對(duì)照組，6-羥多巴組(6-Hydroxydopamine，6-OHDA)，6-OHDA+1u/ml rhEPO組，6-OHDA+6u/ml rhEPO組，6

2、-OHDA+10u/ml rhEPO組。6-OHDA浸泡大鼠黑質(zhì)腦片建立離體帕金森病模型。不同濃度rhEPO在不同時(shí)間點(diǎn)預(yù)處理黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元，觀察黑質(zhì)中酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH)變化。 結(jié)果：rhEPO預(yù)處理能抑制6-羥多巴導(dǎo)致的黑質(zhì)酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)（tyrosine hydroxylase–immunoreactive，TH–IR)陽性細(xì)胞數(shù)減少，6u/ml rhEPO預(yù)處理在3h與6

3、h時(shí)間點(diǎn)的保護(hù)作用優(yōu)于1u/mlrhEPO預(yù)處理（P<0.01，P<0.05），10u/ml rhEPO預(yù)處理在3h與6h時(shí)間點(diǎn)的保護(hù)作用也優(yōu)于1u/ml rhEPO預(yù)處理;但6u/ml rhEPO預(yù)處理與10u/ml rhEPO預(yù)處理對(duì)多巴胺神經(jīng)元的保護(hù)作用差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論：rhEPO預(yù)處理對(duì)黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元具有保護(hù)作用。 第二部分重組人促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)6-羥多巴誘導(dǎo)的離體帕金森病模型黑質(zhì)

4、多巴胺神經(jīng)元凋亡的影響 目的：上一部分的實(shí)驗(yàn)表明了重組人促紅細(xì)胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）對(duì)離體帕金森病模型中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元具有保護(hù)作用，本部分研究rhEPO 預(yù)處理對(duì)離體帕金森病模型中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元保護(hù)作用的機(jī)制。 方法：18 只SD 大鼠分成3組，腦片分別位于空白組、6-羥多巴組、6-羥多巴+6u/ml rhEPO組的人工腦脊液II中孵育6 小時(shí)。然后用免

5、疫組化方法觀測(cè)黑質(zhì)中Caspase-3 免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞數(shù)的變化，TUNEL 法觀測(cè)黑質(zhì)中多巴胺神經(jīng)元的凋亡情況。 結(jié)果：與6-OHDA組相比，6-OHDA+6u/ml rhEPO組中的Caspase-3 免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01)。 結(jié)論：rhEPO 預(yù)處理減輕6-OHDA對(duì)離體帕金森病模型中多巴胺神經(jīng)元的損傷，其機(jī)制可能與rhEPO 抑制黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元凋亡有關(guān)。

6、 第三部分重組人促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)6-羥多巴誘導(dǎo)的離體帕金森病模型黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元氧化應(yīng)激的影響 目的: 第一部分的實(shí)驗(yàn)表明了重組人促紅細(xì)胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）對(duì)離體帕金森病模型中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元具有保護(hù)作用，本部分試驗(yàn)進(jìn)一步研究rhEPO預(yù)處理對(duì)離體帕金森病模型中黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元保護(hù)作用的機(jī)制。 方法：6-羥多巴浸泡大鼠黑質(zhì)腦片建立離體帕金森病模