TWEAK在肝癌細胞系高-低淋巴道轉(zhuǎn)移株中表達的初步分析.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征，也是惡性腫瘤患者的主要死因。腫瘤轉(zhuǎn)移機制的闡明，對認識腫瘤的生物學本質(zhì)具有理論意義，對治療腫瘤有應用價值。腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移較早，腫瘤細胞轉(zhuǎn)移至局部淋巴結(jié)可被視為腫瘤轉(zhuǎn)移的早期信號。但是目前對于腫瘤轉(zhuǎn)移的研究多集中于血道轉(zhuǎn)移，對腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的相關報道較少。本研究旨在揭示TWEAK蛋白在高\低淋巴道轉(zhuǎn)移株(Hca-F\Hca-P)中的表達，為進一步探討腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移奠定基礎。 目的：研究腫瘤壞死因子樣

2、弱凋亡因子(Tumornecrosisfacter-likeweakinducerofapoptosis，TWEAK)在小鼠腹水型肝癌細胞系高\低淋巴道轉(zhuǎn)移株(Hca-F\Hca-P)中的表達情況及差異。 方法：分別提取Hca-F和Hca-P細胞的總RNA，應用基因芯片檢測TWEAK基因；通過RT-PCR在mRNA水平驗證TWEAK基因的表達；提取Hca-F和Hca-P細胞的總蛋白，用蛋白印跡法從蛋白表達水平驗證差異表達；免疫組

3、織化學法驗證TWEAK蛋白的表達。 結(jié)果：基因芯片檢測到TWEAK在Hca-F和Hca-P有顯著差異，Hca-P的TWEAK基因表達較Hca-F高2.1倍；RT-PCR驗證在兩株細胞中均有TWEAK基因的表達，且低轉(zhuǎn)移株強于高轉(zhuǎn)移株；蛋白免疫印跡法檢測到兩株細胞表面均有TWEAK蛋白的表達，低轉(zhuǎn)移株強于高轉(zhuǎn)移株，與基因芯片的結(jié)果一致。免疫組織化學表明，在Hca-F和Hca-P轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中TWEAK蛋白表達量明顯增加，且在Hca-