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文檔簡介
1、目的:探討穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向bc1-2的小發(fā)夾RNA對胃癌細胞株SGC-7901增殖、凋亡及化療敏感性的影響。
方法:構(gòu)建針對bc1-2的小發(fā)夾RNA質(zhì)粒表達載體,轉(zhuǎn)入SGC-7901細胞,篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞克隆繼續(xù)壓力培養(yǎng)。不同濃度的5-Fu或DDP作用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向Bc1-2shRNA的胃癌SGC-7901細胞。RT-PCR法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后SGC-7901細胞bc1-2mRNA的表達,MTT檢測細胞增殖,流式細胞術(shù)檢測細胞凋
2、亡。
結(jié)果:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shRNA后,SGC-7901細胞的bc1-2mRNA表達明顯下降;細胞增殖能力及細胞凋亡率無明顯變化。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組5-Fu的IC5。為14.36±1.63mg/L,未轉(zhuǎn)染對照組為35.62±1.95mg/L(p<0.05);穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組DDP的IC5。為2.53±0.46mg/L,未轉(zhuǎn)染對照組為6.89±0.52mg/L(p<0.05),流式細胞術(shù)顯示穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組凋亡率明顯增高(p<0.05)。
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