慢性乙型肝炎患者肝臟組織TOLL樣受體3、4的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、慢性乙型病毒性肝炎(CHB)的發(fā)病機(jī)制一直是傳染病領(lǐng)域研究的重點(diǎn)、難點(diǎn)。至今，乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性化以及其持續(xù)感染的機(jī)制尚未闡明。在當(dāng)前CHB治療缺乏有效措施的情形下，研究HBV感染慢性化及持續(xù)感染的發(fā)生機(jī)制尤顯重要、緊迫。而HBV感染慢性化應(yīng)是天然免疫(innate immune)和適應(yīng)性免疫共同作用的結(jié)果，HBV感染慢性化機(jī)制中，天然免疫可能起到更重要的作用。天然免疫分子Toll樣受體(TLRs)主要分布在免疫細(xì)胞尤其非特

2、異免疫細(xì)胞以及某些體細(xì)胞表面，不僅激活先天性免疫應(yīng)答，引起細(xì)胞因子的釋放，在天然免疫和炎癥反應(yīng)中具有中心樞紐作用，而且為獲得性免疫的啟動(dòng)提供必要的活化信號(hào)、啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。其中TLR3能識(shí)別存在于病毒基因組或病毒復(fù)制時(shí)產(chǎn)生的dsRNA，啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的轉(zhuǎn)位和IFN-β表達(dá)；TLR4識(shí)別革蘭氏陰性菌胞壁外層內(nèi)毒素的主要成份脂多糖(LPS)來啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)NF-κB和蛋白激酶-1(AP-1)等

3、的活化。肝臟中實(shí)質(zhì)細(xì)胞和非實(shí)質(zhì)細(xì)胞均表達(dá)TLR3及TLR4，TLR3和TLR4信號(hào)系統(tǒng)可能在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。研究TLR3和TLR4在CHB患者肝細(xì)胞的表達(dá)及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有益于了解HBV慢性感染及其發(fā)病機(jī)制。
　　 目的:本課題通過檢測CHB患者肝組織TLR3、TLR4的表達(dá)變化及其與肝臟病理病變程度(肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)、肝組織纖維化程度分期)、CHB臨床分度、血清HBV DNA載量高低、血清HBV-HBeAg

4、狀態(tài)的關(guān)系，探討TLR3、TLR4與CHB的相關(guān)性，TLR3、TLR4在CHB發(fā)病機(jī)制中的角色及TLR3、TLR4對(duì)于CHB的臨床意義。
　　 研究方法:
　　 1.140例CHB肝組織病理切片采用免疫組織化學(xué)SABC染色法檢測TLR3、TLR4的表達(dá)并予以評(píng)分。
　　 2.所有肝組織病理切片均經(jīng)蘇木精+伊紅(HE)、嗜銀網(wǎng)狀纖維染色。
　　 3.然后肝組織TLR3、TLR4的表達(dá)評(píng)分與肝臟病理炎癥活動(dòng)度

5、分級(jí)及纖維化程度分期、臨床分度和血清HBV DNA載量高低、血清HBV-HBeAg進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.TLR3在CHB患者肝組織上表達(dá)較弱，主要表達(dá)于肝細(xì)胞胞漿，有一些表達(dá)于胞核，細(xì)胞膜無染色；TLR4在CHB患者肝組織上主要表達(dá)于肝細(xì)胞胞漿，有一些為肝細(xì)胞膜表達(dá)，細(xì)胞核內(nèi)未見表達(dá)。
　　 2.肝組織TLR3表達(dá)強(qiáng)度與CHB患者的血清HBV DNA載量高低、血清HBV-HBeAg狀態(tài)、臨床分

6、度、肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)之間、肝組織纖維化程度分期(S)之間均無明顯關(guān)系。
　　 3.TLR4表達(dá)強(qiáng)度在輕、中和重度CHB患者肝組織差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Spearman秩相關(guān)性分析顯示肝組織TLR4免疫組化染色強(qiáng)度強(qiáng)度與CHB臨床分度間呈正相關(guān)性，線性趨勢檢驗(yàn)顯示TLR4表達(dá)強(qiáng)度與CHB臨床分度有線性關(guān)系，說明TLR4表達(dá)強(qiáng)度與CHB臨床分度之間不僅存在相關(guān)關(guān)系且為線性關(guān)系，TLR4表達(dá)強(qiáng)度隨著CHB臨床分度的增加而增高。<

7、br>　　 4.TLR4表達(dá)與CHB患者肝臟組織學(xué)的炎癥活動(dòng)度相關(guān)。G1-G4四組之間肝組織TLR4表達(dá)強(qiáng)度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Spearman秩相關(guān)性分析顯示TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)呈正相關(guān)性，線性趨勢檢驗(yàn)顯示TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)有線性關(guān)系，說明TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)之間不僅存在相關(guān)關(guān)系且為線性關(guān)系，TLR4表達(dá)強(qiáng)度隨著肝組織炎癥活動(dòng)度分級(jí)(G)的增加而增高。

8、　　 5.TLR4表達(dá)與CHB患者肝臟組織纖維化程度相關(guān)。在纖維化分期S1-S4的CHB患者，四組之間肝組織TLR4表達(dá)強(qiáng)度的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Spearman秩相關(guān)性分析顯示TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織纖維化程度分期(S)呈正相關(guān)性，線性趨勢檢驗(yàn)顯示TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織纖維化程度分期(S)有線性關(guān)系，說明TLR4表達(dá)強(qiáng)度與肝組織纖維化程度分期(S))之間不僅存在相關(guān)關(guān)系且為線性關(guān)系，TLR4表達(dá)強(qiáng)度隨著肝組織纖維化程度分期(S))的

9、增加而增高。
　　 6.肝組織TLR4表達(dá)強(qiáng)度與CHB患者的血清HBV DNA載量高低、血清HBV-HBeAg狀態(tài)均無相關(guān)性。
　　 結(jié)論:
　　 1.CHB患者肝組織上TLR4的表達(dá)增強(qiáng)，與肝組織的炎癥活動(dòng)、纖維化及病情嚴(yán)重程度有關(guān)，而與血清HBV DNA載量高低、血清HBV-HBeAg狀態(tài)無關(guān)，TLR4可能參與了CHB的發(fā)病機(jī)制，極有可能與CHB免疫損傷有關(guān)。
　　 2.CHB患者肝組織上TLR3的表