柑橘愈傷組織倍性變異中細(xì)胞凋亡途徑的社會(huì)化控制.pdf

1、植物組織培養(yǎng)中普遍存在體細(xì)胞染色體數(shù)目變異現(xiàn)象，這是由于異常有絲分裂造成的。已有研究表明，部分植物在離體培養(yǎng)條件下，其染色體的多倍化變異往往會(huì)隨著時(shí)間延長(zhǎng)而增加。然而，柑橘愈傷組織在繼代10多年后仍然具有較強(qiáng)的胚胎發(fā)生能力，染色體倍性組成卻保持了相對(duì)穩(wěn)定。前人推測(cè)二倍體愈傷組織中的四倍體細(xì)胞在不斷產(chǎn)生的同時(shí)以較高頻率的細(xì)胞凋亡方式被淘汰，從而維持四倍體細(xì)胞比例的穩(wěn)定。 為了驗(yàn)證這一推測(cè)，本文將帶有綠色熒光標(biāo)記的國(guó)慶一號(hào)二倍體細(xì)胞

2、和低密度包埋培養(yǎng)所得四倍體細(xì)胞純系混合懸浮培養(yǎng)，挑取四倍體細(xì)胞包埋切片，發(fā)現(xiàn)部分四倍體細(xì)胞呈典型的細(xì)胞凋亡特征。改變培養(yǎng)條件，統(tǒng)計(jì)凋亡率與共培養(yǎng)時(shí)間和所占比例的關(guān)系。結(jié)果表明，共培養(yǎng)2-7天內(nèi)，混合培養(yǎng)的四倍體凋亡率與單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)差異顯著；當(dāng)樣品中四倍體細(xì)胞數(shù)多于二倍體時(shí)，四倍體表現(xiàn)出更高的凋亡率；凋亡率隨著時(shí)間的增加而增加，其中第2天凋亡率顯著上升。原位末端標(biāo)記分析顯示，等量混合共培養(yǎng)10天時(shí)細(xì)胞凋亡率高達(dá)36.9％，高于形態(tài)學(xué)記數(shù)結(jié)果