甜菜M14單體附加系附加染色體BIBAC芯片的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、在栽培甜菜與野生白花甜菜連續(xù)雜交和回交的過(guò)程中，分離得到具有無(wú)融合生殖特性的甜菜M14品系，該品系附加有白花甜菜9號(hào)染色體，通過(guò)對(duì)連續(xù)四代甜菜M14品系附加染色體傳遞率分析，發(fā)現(xiàn)該染色體隨母本的傳遞率為97％，子代在形態(tài)上也基本一致，因此把無(wú)融合生殖基因或相關(guān)基因定位于附加的白花甜菜9號(hào)染色體上。 利用已構(gòu)建的甜菜M14品系的BIBAC文庫(kù)篩選出2,377個(gè)白花甜菜9號(hào)染色體BIBAC克隆，組成9號(hào)染色體BIBAC文庫(kù)，該文庫(kù)平

2、均插入片段為127kb，庫(kù)覆蓋白花甜菜9號(hào)染色體(80Mb)3.4倍。對(duì)這些克隆分別進(jìn)行BIBAC質(zhì)粒DNA的提取等一系列操作，構(gòu)建一種不同于常規(guī)基因芯片的BIBAC芯片，經(jīng)過(guò)陽(yáng)性探針和隨機(jī)引物探針檢測(cè)，證明該芯片制備重復(fù)性好、背景噪聲低、雜交信號(hào)清晰。 利用已構(gòu)建的BIBAC芯片和甜菜M14與栽培甜菜的花期表達(dá)的mRNA制備的熒光標(biāo)記探針對(duì)附加的白花甜菜9號(hào)染色體BIBAC文庫(kù)進(jìn)行初步表達(dá)分析，來(lái)篩選在M14品系胚胎發(fā)育中特異

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