兒童惡性腫瘤基礎與臨床研究.pdf

1、第一部分兒童神經母細胞瘤的NK細胞獲得性免疫治療研究
　　目的:自然殺傷細胞(NK細胞)及抗腫瘤細胞的細胞膜受體(mAbs)可應用于一系列腫瘤的免疫治療。本研究旨在探討高危神經母細胞瘤(NBL)患兒外周血體外擴增并激活大量具有較強腫瘤細胞殺傷能力的NK細胞的方法,和這些NK細胞在殺傷腫瘤細胞的過程中釋放的細胞因子和趨化因子,以及小鼠體內NK細胞殺傷NBL腫瘤細胞的功能。方法:K562 Clone9.mbIL2和外周血單個核細胞(P

2、BMC)進行共培養(yǎng)。此過程中NK細胞因受到特異性刺激而大量增殖。擴增前后的NK細胞通過流式細胞儀進行免疫表型檢測,使用DIMSCAN的方法對它們的腫瘤細胞殺傷能力進行評估,和Luminex方法進行細胞因子水平量化。并在NOD/SCID小鼠NBL微小殘留病(MRD)全身轉移模型中對這些NK細胞的功能進行體內實驗研究。
　　結果:經與K562 Clone9.mbIL2細胞共培養(yǎng),高危NBL患兒的PBMC在14天后可特異性地將CD56+

3、CD3 CD14 NK細胞擴增和激活2,363±443倍,其純度達到83±4％(n=10)。正常成人PBMC捐獻者(n=5)與K562 Clone9.mbIL2細胞共培養(yǎng),擴增所得的NK細胞所獲結果與之類似。NK細胞擴增前后的細胞表面標記DNAM-1,NKG2D,Fc Y RⅢ/CD16和CD56的表達分別增加了6±3,10±2,21±20,和18±3倍。體外實驗表明,該方法擴增和激活的Nl(細胞對無論常規(guī)治療敏感或者抵抗的腫瘤細胞株均

4、具有高度的殺傷能力。在抗神經節(jié)苷酯GD2細胞膜抗體ch14.18存在的前提下,這種能力得到顯著加強,同時NK細胞大量釋放TNF,GM-CSF,IFNγ,sCD40L,CCL2/MCP-1,CXCL9/MIG,和CXCL11/Ⅰ-TAC等細胞因子和趨化因子。在與腫瘤細胞株反應前后,分別增加4,5,6,15,265,917和363倍(濃度范圍:151-9121pg/mL)。NK細胞經過冷凍保存,解凍后立即經尾靜脈注射入NOD/SCID小鼠N

5、BL模型后,無治療對照組,僅NK治療組,和NK聯合ch14.18組的平均生存時間分別為41±6,54±8,and98±9天(P＜0.04)。
　　結論:大量較強腫瘤細胞殺傷能力的NK細胞可以通過體外擴增而獲得。經過超低溫冷凍保存后,解凍的NK細胞在小鼠體內仍具有高度的抗NBL活性。本研究為高危NBL患兒使用自體PBMC擴增所得NK細胞進行獲得性治療提供了一定的臨床試驗依據。
　　第二部分兒童急性淋巴細胞白血病全程醫(yī)療費用及費

6、用有效性分析
　　目的:分析兒童非高危急性淋巴細胞白血病(ALL)患兒完成全部門診及住院治療所需的醫(yī)療費用及其構成,探討目前所使用方案的費用有效性,為醫(yī)療費用控制提供有效信息。促進管理部門對白血病患兒醫(yī)療費用的有效管理,力求做到合理檢查、合理用藥、合理治療、合理收費的各項規(guī)定。在保證質量和安全的前提下,努力減輕家庭和政府負擔,并為單病癥管理提供一定的科學依據。
　　方法:采集2005年5月-2006年6月我院新診斷并完成AL

7、L-2005方案全部治療計劃的45例急性淋巴細胞白血病(ALL)患兒的全程醫(yī)療費用資料。其中男孩24例,女孩21例,男女比例1.14:1。年齡15月-14歲(167月),中位年齡5歲(61月),平均體重19.89公斤。根據方案的危險度分組標準,低危組(20例)、中危組(25例)。其中B系40例,T系4例,淋巴系雙標記1例。同期高危組或由中低危組轉入高危組共6例患兒不在本統(tǒng)計范圍內。分析不同組別患兒門診、住院及總體治療成本構成。相關費用數

8、據信息來自醫(yī)院財務部門維護完整的電腦數據庫,根據患兒姓名/門診號/住院號進行門診和病房治療費用資料采集分析。
　　結果:ALL治療費用的主要構成是藥費和化驗費,分別占總費用的40.5％和21.5％。人均總醫(yī)療費用為76958.40±48625.98 RMB9住院與門診費用分別占66.4％和33.6％。住院時間約占總治療時間的10％。低危組與中危組、B-ALL和T-ALL、有無嚴重合并癥的人均總治療費用之間的差別有顯著統(tǒng)計學意義,P