藻膽蛋白作為光敏劑應用于腫瘤光動力治療的研究.pdf

1、中國科學技術大學博士學位論文藻膽蛋白作為光敏劑應用于腫瘤光動力治療的研究姓名：李冠武申請學位級別：博士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：李振剛19990701串莓辯學技術穴學博士論文的構象，搜其鴦超螟凌是開巧棟蒙轉攏。漣著藻紅蛋巍懿濃發(fā)鶼增熱，好gDNA的艟逐漸增加，而超螺旋的量逐漸減少?？赡苁怯捎赑DT產生的單線態(tài)氧等活性氧組份慰DNA分子豹囊接剪甥作用，使手罨超螺旋菸麓成為帶切口的環(huán)行DNA分子。飽和氧氣能夠增強藻紅疆白的PDT對

2、瘸細胞的殺傷性。10％血清對PDT的效率沒有影響。卜一第四部分主要是從形態(tài)學、細胞生物學和光化學的角度，對藻紅蛋白介導光動力治療的機制進行了較為系統(tǒng)的研究。f形態(tài)學觀察藻紅蛋白與腫瘤細胞在體內外的結合，表明其介導的光動力效應與藻紅蛋白結合細胞的狀態(tài)有關。隨著藻紅蛋白濃度的增加，細胞結合與瘤細胞的能力增強，光動力殺傷增強。體外藻紅蛋白能夠進入細胞，結合于細胞漿、細胞核；在體內則主要以結合細胞膜和細胞漿為主，未觀察到與細胞核的結合。這可能與

3、體內外的細胞生長環(huán)境有關。從結合曲線看，當濃度達到100pg／ml時，結合曲線較為平緩說明藻紅蛋白結合到瘤細胞表現(xiàn)出一定的飽和性。對藻紅蛋白介導光動力效應誘導細胞凋亡的研究結果顯示：RPEPDT能誘導S180、HL60和7721細胞出現(xiàn)凋亡。DNALadders和流式細胞儀分析的結果均表明，隨著PDT處理后培養(yǎng)的時間延長，凋亡細胞數(shù)逐漸增加。7721是貼壁生長細胞，它在RPEPDT誘導的凋亡過程，表現(xiàn)為變圓、漂浮和成團等幾個過程，同時也

4、檢測到凋亡DNALadders的出現(xiàn)。本部分晟后，以藻紅蛋白光漂白為主要研究對象，對RPEPDT的光化學機制進行了研究。結果表明：藻紅蛋白介導光敏反應遵循Foote反應機制，能夠產生單線態(tài)氧和氧自由基等活性氧組份，二者在一定條件下可互相轉化。I型反應抑制劑二甲亞砜能夠使反應向產生單線態(tài)氧的II型轉換。同時不同濃度的藻紅蛋白的光漂白結果顯示：當藻紅蛋白的濃度達到一定的值(4001as／m1)時，濃度再增加時，光漂白效應并不繼續(xù)上升，達到8