參龍煎劑與北沙參影響實驗性肺纖維化的機制研究.pdf

1、肺間質(zhì)纖維化(PF)是一種原因不明、發(fā)病機制不清、治療尚無確實有效方法的一類以彌漫性肺泡炎和肺泡結構紊亂并最終導致肺組織纖維化為特征的間質(zhì)性肺疾病?，F(xiàn)代醫(yī)學以糖皮質(zhì)激素和細胞毒類藥物治療，但尚無任何方案能逆轉(zhuǎn)炎癥過程或肺纖維化性病變。在中醫(yī)領域，治療研究的焦點開始從單味中藥向中藥復方抗纖維化轉(zhuǎn)變，并以凸現(xiàn)出其獨特的優(yōu)勢。中醫(yī)理論把肺纖維化歸為“肺痿”、“肺痹”范疇，認為肺纖維化的病位在肺而與多臟相關，尤以肺腎最為主要，病機以虛(肺腎氣陰

2、兩虛)為本，瘀(瘀血阻滯肺絡)為標，在治療上以補肺益腎、祛瘀通絡為治療法則，故擬定參龍煎劑。 研究目的： 本實驗研究從病理形態(tài)學、免疫組織化學染色和分子生物學等多角度、多靶點探討中藥復方參龍煎劑和北沙參對博萊霉素致大鼠肺纖維化模型作用機制的研究，并比較其優(yōu)勢。 材料和方法： 1.采用氣管內(nèi)注入博萊霉素的方法復制大鼠肺纖維化模型； 2.本實驗分為五組，正常組、模型組、參龍煎劑劑量組、北沙參組和醋酸強

3、的松組，針對肺纖維化病理演變過程，分為7天、14天、28天三個時間點進行實驗研究。 3.參龍煎劑和北沙參對博萊霉素所致大鼠肺纖維化的肺組織形態(tài)的研究； 通過對模型大鼠一般狀況觀察分析、HE染色、MASSON染色并行圖像分析方法，觀察各組病理組織形態(tài)學的變化，對大鼠肺纖維化模型進行評價，從而研究參龍煎劑對肺纖維化模型大鼠的作用機制，并比較各治療組在整體狀態(tài)和局部組織的不同； 4.參龍煎劑和北沙參對博來霉素所致大鼠肺

4、纖維化肺組織TNF-α蛋白的表達研究通過免疫組織化學染色方法，結合圖像半定量分析技術，研究TNF-α蛋白表達在肺纖維化不同時期的變化，以及參龍煎劑和北沙參對其的影響比較，進一步探討參龍煎劑從免疫組化方面對肺纖維化的作用機制。 5.參龍煎劑和北沙參對博萊霉素致大鼠纖維化中MMP-2mRNA/TIMP-1mRNA(金屬基質(zhì)蛋白酶-2/金屬基質(zhì)蛋白酶組織抑制劑-1mRNA)表達影響的機制研究。 通過RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈

5、反應)的方法，結合圖像半定量分析技術，研究MMP-2mRNA/TIMP-1mRNA表達在肺纖維化不同時期的變化，以及參龍煎劑和沙參對其的影響的比較，進一步探討參龍煎劑從分子生物學方面對肺纖維化的作用機制。 結果： 1.成功復制大鼠肺纖維化模型； 2.參龍煎劑能明顯改善肺纖維化大鼠的整體狀態(tài)、減少肺泡炎及纖維化的面積，從組織結構上減輕PF的程度，優(yōu)于北沙參； 3.參龍煎劑和北沙參均可以降低TNF-α蛋白表達