SHE78-7增強宮頸癌HCE1多細胞球體對順鉑的敏感性及對E-cadherin表達的影響.pdf

1、目的:研究E-cadherin單克隆抗體SHE78-7增強宮頸癌HCE1多細胞球體對順鉑的敏感性及對E-cadherin表達的影響。 方法:(一)運用液體重疊法和旋轉培養(yǎng)法培養(yǎng)宮頸鱗癌HCE1多細胞球體。(二)觀察E-cadherin單克隆抗體SHE78-7作用于HCE1多細胞球體后的形態(tài)學的變化。(三)GST-1法檢測SHE78-7阻斷細胞黏附前后,不同濃度梯度的順鉑對HCE1多細胞球體的增殖抑制作用,以單層細胞作為對照,分別計算I

2、C50值,多細胞耐藥指數(shù)MCRI,并繪制濃度.抑制率曲線。(四)免疫細胞化學檢測SHE78-7干預前后HCE1多細胞球體中E-cadherin的表達,以單層細胞作為對照。
　　結果:(一)多細胞球體的培養(yǎng):HCE1細胞生長狀態(tài):顯微鏡下見HCE1細胞生長狀態(tài)良好,旋轉培養(yǎng)24小時可見細胞聚集成團,并隨培養(yǎng)時間的延長,結構更加緊密,直徑逐漸增大,第4天可出現(xiàn)中心壞死。(二)SHE78-7作用于HCE1多細胞球體后的形態(tài)學的變化:單層

3、細胞對照組:細胞之間連接緊密,成片生長,加入SHE78-7后:細胞之間連接疏松;多細胞球體對照組:細胞能夠形成多細胞球體,球體結構穩(wěn)定,加入SHE78-7后則不能形成多細胞球體,或者細胞雖然聚集在一起,但結構松散,易吹散。(三)GST-1法檢測SHE78-7阻斷細胞黏附前后,不同濃度梯度的順鉑對HCE1多細胞球體的增殖抑制作用,以單層細胞作為對照:SHE78-7阻斷細胞黏附前:順鉑作用于單層細胞的IC502D:6.04mg/ml,多細胞

4、球體的IC503D:18.32mg/ml,MCRI:3.03。SHE78-7阻斷細胞黏附后:順鉑作用于單層細胞的IC502D’:3.17mg/ml,多細胞球體的IC503D’:6.96mg/ml,MCRI’:2.19?？梢奡HE78-7作用后,多細胞耐藥指數(shù)MCRI明顯降低,可增強HCE1多細胞球體對順鉑的敏感性。(四)免疫細胞化學方法檢測SHE78-7干預HCE1多細胞球體前后E-cad的表達,以單層細胞作為對照:染色陽性表現(xiàn)為棕黃色

5、顆粒,單層細胞主要表達在胞膜,多細胞球體胞膜,胞漿都有表達。①HCE1多細胞球體表達E-cad較HCE1單層細胞明顯增高(P<0.05)。②SHE78-7作用HCE1單層細胞和多細胞球體前后,E-cad的表達無明顯變化。
　　結論:1、抗E-cadherin的單克隆抗體SHE78-7對HCE1多細胞球體有解聚作用,并能抑制多細胞球體的形成。2、SHE78-7能增強HCE1多細胞球體對順鉑的敏感性。3、SHE78-7能夠有效抑制HC