細(xì)胞色素P450及GSTs基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：細(xì)胞色素氧化酶（CYP450）參與雌激素代謝的Ⅰ相代謝酶，代謝產(chǎn)物兒茶酚雌激素可誘發(fā)癌癥的發(fā)生，而谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶（glutathione-S-transferase，GSTs）屬于Ⅱ相代謝酶，為一族具有解毒功能的蛋白超基因家族酶系，GSTs可與兒茶酚雌激素的代謝產(chǎn)物醌類化合物結(jié)合形成無(wú)毒性的共軛化合物排出體外。研究表明，編碼CYP450酶的基因在一些位點(diǎn)上存在堿基突變，和GSTs酶基因的缺失多態(tài)性可以導(dǎo)致相應(yīng)酶催化活性的增高

2、或減低，因此被認(rèn)為與一些雌激素依賴性疾病的易感性相關(guān)。本研究旨在探討CYP1A1 Ile→Val多態(tài)性，以及GSTs家族的GSTM1，GSTT1基因的缺失多態(tài)與中國(guó)北方婦女子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。
　　 方法：采用基于人群的病例-對(duì)照研究方法，采集171例子宮內(nèi)膜癌和201例健康對(duì)照個(gè)體的靜脈抗凝血5ml，同時(shí)記錄其病史，個(gè)人相關(guān)資料及婦科腫瘤家族史。以蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限

3、制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）方法檢測(cè)CYP1A1多態(tài)基因型頻率分布；采用多重差別PCR（Multiplex differential PCR，MD-PCR）技術(shù)檢測(cè)GSTM1，GSTT1缺失多態(tài)性基因型頻率分布。
　　 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS11.5版軟件包（SPSS Company，

4、Chicago，Illinois，USA）進(jìn)行，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照組基因型頻率進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析。病例組與對(duì)照組的基因型、等位基因型分布比較均采用行×列表卡方檢驗(yàn)。以非條件Logistic回歸法計(jì)算相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比（odds ratio，OR）及其95％可信區(qū)間（confidence interval，CI）。
　　 結(jié)果：
　　 1.初潮年齡及是否絕經(jīng)在對(duì)照組與病例組的比較

5、>　　 因?qū)φ战M和病例組的初潮年齡平均值為15.24歲，故本研究將病例組和對(duì)照組分別分為初潮年齡<15歲和初潮年齡≥15歲組，病例組中為32.2％和67.8％，在對(duì)照組中為43.4％和56.7％。病例組初潮年齡≥15的人數(shù)比例明顯高于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，在初潮年齡<15和初潮年齡≥15組，子宮內(nèi)膜癌組和對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.028）。根據(jù)是否絕經(jīng)將病例組和對(duì)照組分別分為已絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組并進(jìn)行分析，兩組比較結(jié)果無(wú)顯著性差異（

6、P>0.05）。
　　 2.CYP1A1基因Ile→Val多態(tài)性在病例組與對(duì)照組中的比較
　　 健康對(duì)照組中的CYP1A1基因Ile→Val A→G多態(tài)位點(diǎn)的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡（X2=0.57）。CYP1A1基因Ile→Val多態(tài)野生型（Ile/Ile）、雜合型（Ile/Val）和突變型（Val/Val）基因型頻率在病例組和對(duì)照組分別為59.1％、37.4％、3.5％和59.7％、36.3％、

7、4.0％，病例組雜合型和突變型基因型頻率與對(duì)照組相比無(wú)明顯差別（P>0.05）。A和G等位基因頻率在病例組和對(duì)照組也無(wú)顯著差異（X2=0.01，P=0.978），合并雜合型和突變型與野生型相比，病例組和對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.016，P=0.901）。根據(jù)初潮年齡和是否絕經(jīng)進(jìn)行分層分析的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)CYP1A1基因Ile→Val與子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有明顯的相關(guān)性。
　　 3.GSTM1，GSTT1基因缺失多態(tài)性在病例

8、組與對(duì)照組中的比較
　　 3.1 GSTM1和GSTT1的基因型分布
　　 GSTM1陽(yáng)性基因型（GSTM1+）和GSTM1缺失基因型（GSTM1-）頻率在病例組和對(duì)照組分別為36.3％、63.7％和43.3％、56.7％，兩組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。GSTT1陽(yáng)性基因型（GSTT1+）和GSTT1缺失基因型（GSTT1-）頻率在病例組和對(duì)照組分別為59.1％、40.9％和45.8％、54.2％，病例組GSTT1

9、+基因型頻率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.011）。與GSTT1-相比，攜帶GSTT1+基因型個(gè)體增加子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.709，95％CI=1.132～2.582）。
　　 3.2根據(jù)是否絕經(jīng)進(jìn)行分層分析
　　 在已絕經(jīng)和未絕經(jīng)組，GSTM1的缺失基因型在病例組與對(duì)照組的相比中均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。GSTT1在未絕經(jīng)的病例組與對(duì)照組相比中也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而已絕經(jīng)的病例組

10、與對(duì)照組的相比，GSTT1+基因型頻率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=6.231，P=0.013，OR=0.522，95％CI=0.313～0.870）。
　　 3.3根據(jù)初潮年齡進(jìn)行分層分析
　　 在已初潮年齡<15和初潮年齡≥15組，GSTM1缺失基因型在病例組與對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。GSTT1在初潮年齡≥15的病例組與對(duì)照組相比中也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而在初潮年齡<15組，病例

11、組GSTT1+基因型頻率明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=6.440，P=0.011，OR=0.399，95％CI=0.196～0.811）。
　　 3.4 GSTM1，GSTT1基因缺失多態(tài)聯(lián)合作用與子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的分析
　　 本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)將GSTM1+和GSTT1-視為非暴露因素，將GSTM1-和GSTT1+視為暴露因素，進(jìn)行聯(lián)合分析。采用行X列表卡方檢驗(yàn)，結(jié)果顯示總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=9.

12、82，P=0.02），同時(shí)將GSTM1-和GSTT1+基因型人數(shù)分別與GSTM1-和GSTT1-，GSTM1+和GSTT1+以及GSTM1-和GSTT1+基因型各組比較，其OR分別是1.797（0.962～3.356），2.402（1.230～4.690），和2.455（1.333～4.521）。
　　 4.CYP1A1、GSTM1和GSTT1基因多態(tài)性之間聯(lián)合突變?cè)谂c子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系
　　 采用行×列表卡方檢驗(yàn)

13、，將CYP1A1、GSTM1和GSTT1基因進(jìn)行聯(lián)合分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CYP1A1突變基因型（包括雜合和突變）以及其他GSTM1-，GSTT1+的聯(lián)合基因型與CYP1A1野生型/GSTM1+/GSTT1-的聯(lián)合基因型相比，病例組人數(shù)明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=4.93，P=0.026，OR=2.123，95％CI=1.093～4.127）。
　　 結(jié)論：
　　 1.初潮年齡≥15的個(gè)體其子宮內(nèi)膜癌的患病風(fēng)險(xiǎn)是初

14、潮年齡<15個(gè)體的1.610倍，表明初潮年齡越晚可能是子宮內(nèi)膜癌的易感因素之一。
　　 2.CYP1A1基因Ile→Val多態(tài)中突變的基因型及等位基因型與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)相關(guān)性。根據(jù)是否絕經(jīng)和初潮年齡分層分析也未發(fā)現(xiàn)明顯關(guān)聯(lián)。
　　 3.GSTM1基因缺失多態(tài)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)明顯相關(guān)，根據(jù)是否絕經(jīng)和初潮年齡分層分析也未發(fā)現(xiàn)明顯關(guān)聯(lián)。
　　 4 GSTT1基因缺失多態(tài)性中GSTT1+基因型與子宮內(nèi)膜癌