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文檔簡介
1、[目的]
通過檢測大鼠羊膜上皮細胞(rat amniotic epithelial cells,RAECs)移植治療脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后GAP-43表達量的變化,來探討其在損傷脊髓再生中的作用機理。
[方法]
采用改良-Allen撞擊法,以致傷能量300gcm,選擇T10為撞擊部位,建立大鼠SCI模型。原代培養(yǎng)技術(shù)分離和培養(yǎng)大鼠羊膜上皮細胞,對其進行神經(jīng)營養(yǎng)
2、因子(BDNF、NT-3)的免疫熒光細胞化學檢測。用Hoaest33342標記RAECs,將其移植入脊髓損傷部位,觀察細胞移植后存活與遷移情況。通過采用運動功能測評系統(tǒng)(BBB運動功能評分)來評價大鼠后肢運動功能恢復(fù)的情況。用Glees-Marland’s鍍銀染色觀察AECs移植組(AECs graft group)與鹽水對照組(NScontrol group)損傷灶處的病理變化及軸突再生的情況。分別于移植后第7、14和28天,通過免疫
3、組織化學技術(shù)以及Western-Blot方法,比較AECs移植組與NS對照組GAP-43蛋白的表達量。
[結(jié)果]
RAECs表達神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF、NT-3抗原,移植到損傷脊髓后能長期存活,并與宿主整合良好,無免疫排斥反應(yīng);大鼠羊膜上皮細胞能促進脊髓功能的恢復(fù)及軸突的再生,移植后28天BBB評分檢測結(jié)果,AECs移植組(8.26±0.89)明顯好于NS對照組(4.98±1.03)(P<0.01);免疫組化及
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