參松養(yǎng)心膠囊抗心律失常機理研究.pdf

1、心律失常是臨床上常見且又對患者的生活質量和生命安全影響極大的心血管疾病。從90年代CAST和CASTII試驗結果公布以來，人們開始重視抗心律失常藥物治療的收益與風險評估。參松養(yǎng)心膠囊(SSYX)是一種復方制劑，方中多數(shù)藥物均有較好的抗心律失常作用。動物實驗證明，SSYX可以明顯抑制藥物誘發(fā)的心律失常；隨機臨床驗顯示，SSYX對治療冠心病心律失常有明顯療效。關于SSYX抗心律失常的機制和對心肌細胞離子通道的影響至今未見報道。 目的

2、：觀察SSYX干粉提取溶液對單個心室肌細胞L型鈣電流(I<,Ca,L>)，鈉電流(I<,Na>)，瞬時外向鉀電流(I<,to>)，內向整流鉀電流(I<,K1>)，延遲整流鉀電流慢成分(I<,Ks>)的影響，以及對在HEK293細胞表達hERG通道電流(I<,Kr>)的影響。探討SSYX在離子通道水平的抗心律失常作用機制。 方法：急性分離豚鼠和大鼠心臟，用Langendoff灌流系統(tǒng)離體灌流，聯(lián)合使用膠原酶Ⅱ和蛋白酶E，分離獲得單

3、個的心室肌細胞。培養(yǎng)HEK293細胞，用脂質體瞬時轉染pcDNA3.1-hERG和pEGFP-C1質粒，于轉染后24～48h在熒光顯微鏡下，對有綠色熒光表達的細胞進行電生理記錄。用標準的全細胞膜片鉗記錄技術，記錄豚鼠心室肌細胞的I<,Ca,L>，I<,Na>，I<,K>電流，大鼠心室肌細胞的I<,to>和I<,K1>電流，以及轉基因陽性HEK293細胞的I<,Kr>電流。觀察SSYX干粉提取溶液對各種離子通道電流的影響。 結果：

4、通過酶解法得到的豚鼠和大鼠心室肌細胞能夠記錄到動作電位和各種離子通道電流，表明其具有良好的細胞電生理特性。大約40％～60％瞬時轉染后HEK293細胞表達綠色熒光蛋白，同時可記錄到I<,Kr>通道電流，表明細胞模型構建成功。文中介紹了SSYX對動作電位的影響、SSYX對I<,Ca,L>通道的影響、SSYX對I<,Na>通道的影響、SSYX對I<,to>通道的影響、SSYX對I<,K1>通道的影響、SSYX對I<,Ks>通道的影響，以及S

5、SYX對I<,Kr>通道的影響。 結論：參松養(yǎng)心膠囊干粉提取溶液對I<,Ca>,L、I<,Na>、I<,to>、I<,Ks>和I<,K1>多種心室肌離子通道均具有不同程度的阻滯作用。SSYX可以抑制豚鼠心室肌細胞I<,Ca>,L的峰值電流，使通道的時間依賴性激活和失活減慢，并促進通道的電壓依賴性失活，使穩(wěn)態(tài)失活曲線的V<,1/2>左移。SSYx可以抑制豚鼠心室肌細胞I<,Na>的峰值電流，并使通道的穩(wěn)態(tài)激活曲線右移。SSYX可以

6、抑制大鼠心室肌細胞I<,to>峰值電流，加速通道時間依賴性失活，并促進通道的電壓依賴性失活。SSYX可以抑制大鼠心室肌細胞I<,K1>的內向成分。SSYX可以抑制豚鼠心室肌細胞I<,K>電流，主要是作用于其慢激活成分I<,Ks>。SSYX對hERG通道的電流幅度，通道失活速度及通道失活后恢復速度無顯著影響。 SSYX對這些通道的綜合作用可使得心肌細胞的除極幅度降低，動作電位時程和有效不應期延長，這可能是其產(chǎn)生抗心律失常作用的機制。同時這