鴨腺病毒3型基因組序列分析及致病性研究.pdf

1、禽腺病毒是家禽常見(jiàn)的傳染性病原體，會(huì)直接或間接地致病，大多數(shù)禽腺病毒在健康家禽體內(nèi)復(fù)制但不產(chǎn)生明顯的臨床癥狀，當(dāng)不良因素刺激，特別是疾病使動(dòng)物免疫力下降，腺病毒則很快發(fā)揮其機(jī)會(huì)性病原體的作用。國(guó)內(nèi)外曾報(bào)道了鴨腺病毒1型和2型，本研究分離鑒定的鴨腺病毒3型在國(guó)內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)并報(bào)道，系統(tǒng)研究該病毒對(duì)鴨腺病毒病的防控具有重要的意義。
　　本研究從國(guó)內(nèi)發(fā)病番鴨體內(nèi)分離到一株新型病毒，成功在鴨胚成纖維細(xì)胞上繁殖后，通過(guò)透射電子顯微鏡、血凝實(shí)驗(yàn)

2、和理化實(shí)驗(yàn)對(duì)病毒粒子的形態(tài)和理化特征進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明該病毒屬于新型腺病毒，并命名為CH-GD-12-2014。隨后通過(guò)高通量測(cè)序，獲得了該病毒的全基因組序列。全基因組序列分析表明CH-GD-12-2014株與2014年奧地利科學(xué)家Ana Marek發(fā)表的鴨腺病毒2型GR株具有92％的同源性。全基因組進(jìn)化樹(shù)也表明CH-GD-12-2014株、鴨腺病毒2型GR株和鵝腺病毒4型（GAdV-4）同屬于Ⅰ群禽腺病毒屬上的一分支。進(jìn)一步分析顯

3、示CH-GD-12-2014株和GR株并不屬于同一類(lèi)型的鴨腺病毒。CH-GD-12-2014株有兩個(gè)fiber基因，而 GR株只有一個(gè)fiber基因。CH-GD-12-2014株的hexon氨基酸序列與GR株只有60%的相似性。結(jié)果表明CH-GD-12-2014株是另一種新型的鴨腺病毒，命名為鴨腺病毒3型（DAdV-3）。
　　為了進(jìn)一步研究該病毒的致病性，本研究以番鴨胚、SPF雞、白鴨、番鴨和SPF紹興麻鴨為研究對(duì)象。通過(guò)腿部肌

4、肉注射病毒并定期解剖觀察各組織器官的病變情況。同時(shí)采集組織樣品（肝臟、心臟、肌胃、腺胃、脾、腸、法氏囊、腎臟、肺臟、胸腺
　　等）制作病理切片。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：CH-GD-12-2014具有明顯的致病性，感染率為100%。被感染動(dòng)物的肝臟、心臟及腎臟等器官病變明顯，其中肝臟最為嚴(yán)重，表現(xiàn)為黃化、腫大充血、質(zhì)地變脆，表面有不同程度的出血點(diǎn)、出血斑以及大小不等的壞死灶等癥狀。動(dòng)物免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，滅活疫苗能刺激動(dòng)物體產(chǎn)生一定量的抗體