腦缺血預處理對腦組織線粒體ATP酶活性、GSH-PX活力及MDA水平的影響.pdf

1、目的：通過研究腦缺血預處理對再次腦缺血的神經功能、海馬區(qū)HE染色以及腦組織線粒體AIP酶活性、GSH-PX活力和MDA水平的影響，進一步探討腦缺血耐受引起的腦保護機制。 方法：48只雄性SD大鼠（體重230-300g）隨機分成4組：假手術組（n=12），單純預處理組（n=12），腦缺血組（n=12），預處理后腦缺血組（n=12）。動物模型制作：假手術組：頸部正中切口暴露頸總動脈后縫合皮膚。單純預處理組：按Longa線栓法略加以改

2、良，制成局灶-局灶腦缺血模型。先麻醉大鼠，分離右側頸總及頸內外動脈及翼腭動脈，結扎翼腭動脈。結扎頸外動脈遠端，在頸外動脈近端剪一小口，經此小口插入備好的線栓（直徑0.16～0.20mm高彈力碳素魚線，插線頭燒成圓頭，臨用時蘸取肝素）經頸外動脈到頸內動脈入顱至大腦中動脈，一次性缺血30分鐘后，拔出線栓，結扎頸外動脈近端，縫合皮膚。腦缺血組：暴露并分離右側頸總動脈（CCA）、頸內動脈（ICA）、頸外動脈（ECA）及翼腭動脈，并結扎翼腭動脈及

3、ECA根部。結扎CCA近心端，用動脈夾夾閉ICA遠端，其間剪一小口，從切口插入備好的線栓，去除ICA端的動脈夾，緩慢推進線栓約17～20mm，扎緊結扎線并固定插線，栓塞24小時；預處理后腦缺血組：按上述手術步驟完成腦缺血預處理，24小時后如上步驟再栓右側大腦中動脈，缺血時間為24小時。分別觀察四組動物的以下指標：按Bederson6級5分法進行神經功能評價（每組12只）；HE染色比較各組海馬CA1區(qū)變化；生化檢測方法檢測線粒體ATP酶活

4、性、GSH-PX活力和MDA水平。 結果： 神經功能評分：假手術組均為0分；單純預處理組為0.25±0.2；腦缺血組為2.24±0.87；預處理后腦缺血組為1.16±0.2。 單純預處理組與假手術組比較（p>0.05）：單純預處理組神經功能評分低于腦缺血組（p<0.05），差異有統計學意義。 HE染色：假手術組腦組織結構正常，無水腫；單純預處理組腦組織結構正常，無明顯水腫；鏡下正常神經元核圓形，邊界及核仁

5、清楚；腦缺血組損傷累及廣泛皮層及紋狀體外側，損傷神經元胞核腫大，偏位，核仁消失，胞漿著色淺、蒼白或核濃縮、深染，數目減少；預處理后腦缺血組病理改變較輕，缺血中心區(qū)與周圍區(qū)界限尚清，可見神經元、星形膠質細胞呈輕到重度的腫脹，少數神經元呈變性壞死改變。 神經元損傷統計：假手術組為13.22±4.21；單純預處理組為13.20±7.40；腦缺血組為90.02±10.51；預處理后腦缺血組為61.41±8.64，假手術組與預處理組的比較

6、（p>0.05）；預處理后腦缺血組與腦缺血組比較以及上述兩組與假手術組之間的比較（p<0.05），差異有統計學意義。 生化檢測： （1）Na+，K+-ATP和Ca2+，Mg2+-ATP酶活性：假手術組的分別為3.72±1.52，3.58±0.59；單純預處理組的分別為3.58±0.78，3.69±0.32；腦缺血組的分別為2.27±0.56、2.34±0.5；預處理后腦缺血組的分別為2.79±0.61，2.85±0.65

7、，單純預處理組與假手術組比較無明顯差異（p>0.05）；預處理后腦缺血組高于腦缺血組（p<0.05），差異有統計學意義。 （2）谷胱甘肽過氧化物（GSH-PX）活力檢測結果顯示假手術組為21.59±2.58，單純預處理組為22.21±3.55，腦缺血組為12.56±3.27，預處理后腦缺血組為16.02±1.82，單純預處理組與假手術組比較無明顯差異（p>0.05）；預處理后腦缺血組高于腦缺血組（p<0.05），差異有統計學意義

8、。 （3）丙二醛（MDA）水平檢測結果：假手術組為3.55±1.04，單純預處理組為3.89±0.53， 腦缺血組為5.86±1.08，預處理后腦缺血組為4.29±0.95，單純預處理組與假手術組比較無明顯差異（p>0.05），預處理后腦缺血組低于腦缺血組（P<0.05），差異有統計學意義。 結論：預處理后腦缺血組神經功能好于腦缺血組。海馬CA1區(qū)腦組織HE染色發(fā)現預處理后腦缺血組的損傷明顯小于腦缺血組，且預處理后腦缺血