微生物來源的神經(jīng)保護化合物的篩選及其作用機制的研究.pdf

1、帕金森癥、阿爾茨海默病、亨廷頓氏舞蹈病等神經(jīng)退行性疾病是一種以原發(fā)性神經(jīng)元變性為基礎(chǔ)的進行性慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，對中老年人的健康有嚴重的威脅。目前，臨床上應用的抗神經(jīng)退行性疾病藥物大多是以改善臨床癥狀為主，無法控制其病程進展，遠不能滿足治療的需求。因此，創(chuàng)制抗神經(jīng)退行性疾病新藥對預防和治療這類疾病具有重大意義。
　　 本論文采用神經(jīng)系統(tǒng)研究中常用的PC12細胞氧化損傷模型，對875種微生物來源的天然產(chǎn)物或其衍生物進行篩選，結(jié)果顯示

2、，在終濃度為10μg/mL時，有90種化合物能不同程度地提高H2O2誘導損傷的PC12細胞存活率，對氧化應激損傷細胞具有明顯的保護活性，占供篩選化合物的10.29％;其中有26種化合物作用效果穩(wěn)定，與損傷組相比，結(jié)果具有統(tǒng)計學意義，占供篩選化合物的2.97％。在這些具有神經(jīng)保護活性的化合物中，來源于海洋真菌Aspergillus sp.AF119的化合物AFN-10和來源于紅樹植物內(nèi)生真菌HTF3菌株的化合物ZJ019的活性較強、作用效

3、果較好。篩選結(jié)果表明，微生物來源的小分子化合物中蘊含著不少具有神經(jīng)保護活性的化合物，是開發(fā)抗神經(jīng)退行性疾病藥物的重要來源。
　　 為了進一步探討化合物AFN-10和ZJ019對PC12細胞損傷保護作用的機制，本論文用MTT法、熒光染色觀察、流式細胞術(shù)檢測、Western blot等方法對H2O2氧化損傷的PC12細胞進行了一系列生理生化檢測。結(jié)果顯示，化合物AFN-10和ZJ019能夠明顯抑制H2O2誘導的PC12細胞的凋亡，降

4、低細胞凋亡率，這一結(jié)果與MTT法檢測細胞存活率結(jié)果趨勢一致。進一步研究顯示，化合物AFN-10和ZJ019在10μmol/L-50μmol/L濃度范圍內(nèi)作用效果最好，其對PC12細胞的保護作用機制與其清除細胞內(nèi)ROS的能力有關(guān):通過提高PC12細胞內(nèi)GSH的含量來保持細胞內(nèi)的ROS處于合理的水平，從而維持線粒體膜電位的穩(wěn)定，保持線粒體結(jié)構(gòu)和功能的正常。同時，化合物AFN-10和ZJ019能夠促進H2O2誘導的PC12細胞Bcl-2蛋白和