含碘吲哚青綠與無碘吲哚青綠對兔視網膜影響的實驗研究.pdf

1、目的 探討視網膜內界膜剝除術中玻璃體腔內使用含碘吲哚青綠(indocyaninegreen，ICG)和無碘吲哚青綠(infracyanine green，ifCG)輔助染色內界膜對視網膜影響的差異。 方法 選取健康青紫藍兔48只，隨機分為6組，每組8只，分別為BSS組、ifCG組、ICG組、BSS+L組、ifCG+L組及ICG+L組。各組動物均以左眼為實驗眼，行經扁平部玻璃體切除術后，BSS組玻璃體腔內注入無菌手

2、術平衡液(balancedsalt solution，BSS)0.1 ml，作為對照組；ifCG組玻璃體腔注入0.1 ml 0.5％ifCG，染色黃斑部視網膜內界膜2 min后，BSS灌洗玻璃體腔；ICG組玻璃體腔注入0.1ml 0.5％ICG，染色視網膜黃斑部內界膜2 min后，BSS灌洗玻璃體腔； BSS+L組、ifCG+L組、ICG+L組分別在BSS組、ifCG組、ICG組的手術操作基礎上，即染色視網膜并灌洗玻璃體腔后，用玻璃體切

3、除術中應用的眼內導光纖維以5800mW/cm<'2>照射視網膜黃斑部10 min。術后1 d、14 d分別行組織病理學檢查、透射電子顯微鏡檢查和閃光視網膜電圖檢查。 1．組織病理學檢查：術后1 d及14 d，每組動物中隨機各選2只處死，眼球取材后經固定、脫水、透明、包埋、切片后，行蘇木素．伊紅染色。隨機選取切片，觀察視網膜形態(tài)改變，測量并比較各組間的黃斑部視網膜厚度。 2．透射電子顯微鏡檢查：術后1 d及14 d，每組動

4、物中隨機各選2只處死，取黃斑部視網膜組織經固定、脫水、浸透、包埋、半薄切片染色定位后，制作110nm超薄切片，醋酸雙氧鈾和枸櫞酸鉛雙重染色后，透射電子顯微鏡下觀察視網膜超微結構的改變。 3．閃光視網膜電圖檢查(flash electroretinogram，fERG)：術后1d及14d，每組動物中隨機選取4只散大瞳孔暗適應后分別行雙眼fERG檢查。每眼重復檢。查5次，分別記錄fERG中雙眼b波波幅和振蕩電位(oscilatory

5、 potentials，OPs)，以左眼與右眼測量數值平均數的比值作為左眼視網膜功能的指標，比較各組間此比值的差異。 結果 1．眼組織病理學檢查： (1)術后1 d：與BSS組相比，ifCG組和ICG組的神經節(jié)細胞層和神經纖維層輕度水腫，內核層外核層細胞排列較紊亂，視網膜厚度均增加(P<0.05)，但ifCG 組與ICG組之間無明顯形態(tài)區(qū)別和視網膜厚度的差異(P>0.05)。與單純染色組(ifCG組、ICG組)相

6、比，染色聯合光照組(ifCG+L組、ICG+L組)神經纖維層空泡變性增加，神經節(jié)細胞明顯水腫，視網膜厚度增加(P<0.05)。 (2)術后14 d：與BSS組相比，ifCG組和ICG組神經纖維層空泡化，外核層明顯變薄，各層排列欠規(guī)整，視網膜厚度均較BSS組增加(P<0.05)。但ifCG組與ICG組之間無明顯形態(tài)區(qū)別和視網膜厚度的差異(P>0.05)。與單純染色組(ifCG組、ICG組)相比，染色聯合光照組(ifCG+L組、IC

7、G+L組)神經纖維層和神經節(jié)細胞層萎縮程度增加，外核層排列更加紊亂，視網膜厚度降低(P<0.05)。 2．透射電子顯微鏡檢查： (1)術后1 d：BSS組各層細胞結構清晰規(guī)整；ifCG組外核層細胞核間隙見少量空泡，外節(jié)排列較整齊，色素上皮細胞內含有較多的層狀結構。ICG組外核層輕度變稀疏，外節(jié)少量膜盤排列欠規(guī)整，色素上皮細胞內含有較多的層狀結構。Bss+L組外核層排列整齊，外節(jié)見輕度腫脹，色素上皮細胞內含有大量的層狀結構

8、。ifCG+L組外核層細胞腫脹，細胞質濃縮，外節(jié)排列不規(guī)整，色素上皮細胞內含有大量的層狀結構。lCG+L組外核層細胞間質腫脹變寬，外節(jié)排列欠規(guī)整，色素上皮層輕度水腫。 ICG組、ifCG組較BSS組有明顯的超微結構改變，而且ICG組的超微結構改變較ifCG組明顯；眼內光照后，BSS+L組、ifCG+L組和ICG+L組的視網膜超微結構改變依次明顯，而且分別較BSS組、ifCG組、ICG組改變更為明顯。 (2) 術后14 d

9、：BSS組視網膜結構依舊清晰規(guī)整。ifCG組外核層細胞核間隙仍見少量空泡，細胞間隙增大，外節(jié)膜盤排列整齊，色素上皮細胞內含有較多的空泡樣結構。ICG組外核層稀疏變薄，細胞核間隙增大，外節(jié)稀疏變薄，色素上皮細胞內有空泡存在。BSS+L組外核層內少量空泡，外節(jié)可見個別空泡存在，色素上皮細胞高度均一。ifCG+L組外核層細胞指狀稀疏，膠質細胞增殖，外節(jié)部分膜盤裂隙增大，色素上皮細胞內有空泡存在。ICG+L組外核層細胞指狀稀疏，膠質細胞增殖，外

10、節(jié)排列不規(guī)整，色素上皮細胞內有空泡存在。 ICG組、ifCG組較BSS組仍然有明顯的超微結構改變；但各組間差異變??；聯合眼內光照后，染色組的超微結構改變更加明顯，各組比較結果與1 d時相似，但差異更小。 3．閃光視網膜電圖檢查： (1)術后1 d：各組暗適應fERG b波波幅比值和Opa比值的染色因素之間比較顯示，ICG染色的兩組(ICG組，ICG+L組)較ifCG染色的兩組(ifCG組，ifCG+L組)降低，且

11、均小于相應的兩個對照組(BSS組、BSS+L組)；而相應的未光照組和經過光照組的組間比較，經過光照的3個組均較其對應組降低，差異有顯著意義。染色因素和光照因素沒有明顯的交互影響。 (2) 術后14 d：各組暗適應fERG b波波幅比值和Ops比值的染色因素之間比較顯示，ICG染色的兩組(ICG組，ICG+L組)與ifCG染色的兩組(ifCG組，ifCG+L組)之間差異無顯著意義，均較相應的兩個對照組(BSS組、BSS+L組)降低