咪喹莫特作為佐劑的透皮免疫效果研究.pdf

1、皮膚是人體的最大的組織和器官，它的表面積接近2m<'2>。皮膚也是一個具有獨特免疫功能并與全身免疫系統(tǒng)密切相關的組織器官。 德國的醫(yī)學學生Iangerhans P于1868年首次發(fā)現并描述了皮膚中的抗原遞呈細胞，后被命名為朗格漢斯細胞(Iangerhans cell，LC)。未成熟的朗格漢斯細胞具有較強吞噬處理抗原能力，并沿淋巴管遷移至近側引流淋巴結(draininglymph nodes，DLN)的T細胞區(qū)并分化成熟而具有很強

2、的抗原遞呈(包括交叉遞呈)能力。 透皮免疫(Transcutaneous immunization，TCl)是一種新的疫苗接種方法。它通過在皮膚表面局部應用免疫佐劑和疫苗抗原來使機體產生全身性免疫反應。通過透皮劑等技術手段，使疫苗抗原進入表皮中并被表皮朗格漢斯細胞吞噬，在佐劑的作用下，迅速引發(fā)全身性的免疫反應，從而達到免疫效果。 2004年Karande等發(fā)現了透皮劑聚氧乙烯十二烷基醚硫酸鈉(sodium laureth

3、sulfate，SLA)+苯基哌嗪(phenyl piperazine，PP)的組合，該組合能夠有效促進分子量小于1～10kD的生物大分子的透皮，并不誘導皮膚損傷。SLA+PP的組合能夠在離體的皮膚中最大限度的促進肝素、促黃體(生成)激素．釋放激素等生物大分子的透皮；在小鼠皮膚上的實驗也證實醋酸亮丙瑞林能夠在促透劑的作用下進入小鼠體內。 在研究人類單純皰疹病毒的治療時發(fā)現imiquimod具有很強的抗病毒和抗腫瘤活性，美國3M公

4、司在1997年將其上市，制成5％的外用軟膏劑(商品名Aldara)。咪喹莫特可以刺激單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞產生以干擾素IFN-α、腫瘤壞死因子TNF-α、白介素IL-1、6、8、10、12為代表的多種細胞因子。我們用咪喹莫特免疫刺激特性作為透皮佐劑，研究亞單位疫苗、病毒疫苗、DNA疫苗三種疫苗的透皮免疫效果。 聚氧乙烯十二烷基醚硫酸鈉和苯基哌嗪混合之后溶于等體積PBS緩沖液和無水乙醇混合液中，制成透皮劑。將其分別與HBV

5、亞單位抗原、HBsAg DNA疫苗、滅活的HAV抗原混合后，涂抹于小鼠脫毛的背部皮膚表面，同時涂抹咪喹莫特作為佐劑，分別在2、4、6、8、12、20周用ELISA法檢測血清中的抗體水平。在透皮免疫2周后即可在用咪喹莫特作為佐劑的HBV亞單位抗原組和DNA疫苗組中用EL,ISA法檢測到血清中的抗體，平均分別為1:19.1和1:30.3；抗體滴度在8周達到最高水平，平均分別為1:105.6和1:105.6；無佐劑組在4周才檢測到抗體，抗體滴