美金胺聯(lián)合托吡酯對(duì)新生鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用研究.pdf

1、背景與目的
　　 缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)會(huì)造成神經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡，不但嚴(yán)重威脅新生兒的生命，而且會(huì)導(dǎo)致一系列神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。腦內(nèi)能量代謝障礙而引起腦組織早期壞死和延遲凋亡是HIE重要的病理機(jī)制之一。在此過(guò)程中，腦細(xì)胞供氧供能發(fā)生障礙可以引發(fā)一系列病變，包括谷氨酸受體激活，尤其是N-甲基-D-天冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartate，NMDA)系統(tǒng)的

2、激活，細(xì)胞游離鈣離子的蓄積以及鈣離子介導(dǎo)的自由基損傷和線粒體功能損傷，最后導(dǎo)致細(xì)胞壞死和凋亡。美金胺作為一種新型的非競(jìng)爭(zhēng)性NMDA受體拮抗劑，具有較好的神經(jīng)保護(hù)作用的同時(shí)不會(huì)影響正常的神經(jīng)活動(dòng)。托吡酯作為一種AMPA/KA受體拮抗劑, 具有多種的神經(jīng)保護(hù)作用且毒性小。從理論上講，這兩種神經(jīng)保護(hù)機(jī)制相互依賴(lài)、有協(xié)同作用，因此我們推測(cè)美金胺和托吡酯聯(lián)合用藥能有效地減輕新生鼠的缺氧缺血性腦損傷（hypoxic-ischemic brain i

3、njury, HIBI）。
　　 材料與方法
　　 7日齡SD大鼠192只按Rice方法制備HI模型。新生大鼠分成4組: ①HI組：只注射生理鹽水；②美金胺組： HI后即刻經(jīng)腹腔注射美金胺20mg/kg，其后每12小時(shí)注射1mg/kg維持量，共四次。③托吡酯組： HI后即刻經(jīng)腹腔注射托吡酯40mg/kg，其后每12小時(shí)注射10mg/kg維持量，共四次。④聯(lián)合用藥組HI后即刻經(jīng)腹腔注射美金胺20mg/kg，其后每12小時(shí)注

4、射1mg/kg維持量，共四次。同時(shí)，經(jīng)腹腔注射托吡酯40mg/kg，其后每12小時(shí)注射10mg/kg維持量，共四次。
　　 HI后48小時(shí)進(jìn)行TUNEL染色凋亡檢測(cè)及Caspase-3免疫活性檢測(cè)和陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，及HI后72小時(shí)進(jìn)行神經(jīng)損傷評(píng)分以評(píng)價(jià)其短期效果。HI后21日進(jìn)行足錯(cuò)誤測(cè)試，評(píng)估其神經(jīng)功能。HI后22日采用TTC染色觀察病理改變，并對(duì)腦損傷按Palmer等的方法進(jìn)行評(píng)分和測(cè)量右腦重量缺失，即右腦半球相對(duì)左腦半球重量

5、損失的百分比。用SPSS15統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，F(xiàn)單因素方差分析進(jìn)行組間均數(shù)比較，P＜0.05被認(rèn)為差異有顯著性。
　　 結(jié)果
　　 1. TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)：在海馬CA1區(qū)和皮質(zhì)下白質(zhì)區(qū)，聯(lián)合用藥組顯著少于對(duì)照組。Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)與TUNEL結(jié)果一致。
　　 2. 顯微神經(jīng)損傷評(píng)分：在皮質(zhì)、丘腦及海馬區(qū)，聯(lián)合用藥組神經(jīng)損傷顯著減少。
　　 3. 足錯(cuò)誤測(cè)試：聯(lián)

6、合用藥組足錯(cuò)誤次數(shù)顯著少于對(duì)照組。
　　 4. 腦損傷評(píng)分：聯(lián)合用藥組評(píng)分顯著低于對(duì)照組。
　　 5. 右腦重量缺失百分比：聯(lián)合用藥組顯著低于對(duì)照組。
　　 結(jié)論
　　 1. 美金胺與托吡酯聯(lián)合用藥不但減輕了短期神經(jīng)損傷而且減少了長(zhǎng)期腦組織損傷。
　　 2. 美金胺與托吡酯聯(lián)合用藥在海馬CA1區(qū)和皮質(zhì)下白質(zhì)區(qū)可顯著減輕神經(jīng)細(xì)胞凋亡。
　　 3. 美金胺與托吡酯聯(lián)合用藥不僅顯著改善了病理結(jié)果