淫羊藿總黃酮對去勢雄兔干眼癥淚腺的保護作用.pdf

1、目的：在成功構建雄兔干眼癥模型的基礎上，觀察淫羊藿總黃酮對去勢雄兔干眼癥淚腺的保護作用及凋亡相關基因蛋白表達的影響，探討淫羊藿總黃酮抗雄激素水平下降所致干眼癥的機制，擴增中醫(yī)藥治療干眼癥的臨床應用。
　　方法：(1)以去勢的方法構建雄兔干眼癥模型，采用正交設計，隨機對照的方法進行試驗研究。取健康2月齡，體重2.0-2.5kg雄性日本大耳兔60只（貴陽醫(yī)學院動物中心提供），隨機分為A1、B1、C1、D1、E1、A2、B2、C2、D2

2、、E2、A3、B3、C3、D3、E3共15組，每組5只。A代表正常組；B代表假手術組；C代表模型對照組；D代表雄激素(丙酸睪酮)治療組；E淫羊藿總黃酮治療組。1代表飼養(yǎng)一個月；2代表飼養(yǎng)兩個月；3代表飼養(yǎng)三個月。（2）分別于造模前、末次給藥后行Schirmer試驗（SIT）；耳緣靜脈采血，測血清黃體生成素（LH）。取材后進行HE染色，在光鏡及透射電鏡下觀察淚腺細胞形態(tài)學變化；運用免疫組織化學方法測定淚腺組織中免疫、炎癥反應因子及相關基因

3、蛋白的表達；用原位雜交方法測定淚腺組織中雄激素受體(AR)密度。
　　結果：（1）各組SIT測量：C組濾紙濕長縮短，與去勢前差異有顯著性(P<0.05)，隨時間的延長差異無顯著性(P>0.05)。D組濾紙濕長與B組比較增長明顯，差異有顯著性(P<0.05)。E組濾紙濕長與B組比較增長明顯，差異有顯著性(P<0.05)。（2）LH檢測結果：A1、B1、C1、D1、E1各組間LH含量有顯著性差異，隨時間延長各組LH含量沒有顯著性差異。

4、（3）HE染色及透射電鏡結果顯示：A、B組淚腺細胞形態(tài)結構無明顯改變；C組淚腺細胞結構有明顯改變，且隨時間增長逐漸加重；D、E兩組間淚腺細胞結構改變較 C組明顯減輕。（4）免疫組織化學方法結果顯示：A、B、D、E組淚腺導管及淚腺上皮細胞中Bax、TNF-α表達明顯低于C組；而TGF-β1、Bcl-2表達明顯高于C組。（5）原位雜交方法結果顯示：A、B、D、E組雄激素受體密度均高于 C組。
　　結論：初步證實淫羊藿總黃酮能減輕去勢雄