白藜蘆醇在大鼠體內(nèi)的藥代動力學及其對CYP1A1酶活性的影響.pdf

1、目的:①建立檢測大鼠血漿中白藜蘆醇的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)方法;②利用該法進行白藜蘆醇在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究;③探針藥物法評價白藜蘆醇對大鼠肺和肝臟CYP1A1酶活性的影響。方法:①以柚皮素為內(nèi)標,Hypersil GOLD C18為分析柱,甲醇:水(70:30)為流動相,流速0.3 ml/min,柱溫30℃;采用ESI離子源,負離子掃描,多級反應監(jiān)測(MRM)模式,選擇監(jiān)測的離子對分別為m/z227.1→143.1

2、(白藜蘆醇)和m/z271.1→151.1(內(nèi)標)。大鼠血漿樣品經(jīng)乙醚萃取后,氮氣吹干上層有機相,殘留物用流動相溶解,取上清液進樣分析。②SD雄性大鼠灌胃給予100 mg/kg白藜蘆醇,于給藥前(0h)及給藥后0.083、0.167、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12 h眼眶后靜脈叢采血并分離血漿,測定血漿中白藜蘆醇的濃度,DAS軟件計算藥代動力學參數(shù)。③鈣沉淀法制備大鼠肺和肝微粒體,7-乙氧基試鹵靈作為C

3、YP1A1的特異性探針底物,測定不同濃度的白藜蘆醇對微粒體CYP1A1酶活性的影響,計算其 IC50值。結(jié)果:①大鼠血漿中白藜蘆醇在2～5000μg/L濃度范圍內(nèi)線性良好,典型標準曲線為y=0.00362x+0.01986,R2=0.9996,最低定量限為2μg/L,日內(nèi)、日間精密度,準確度和基質(zhì)效應均在誤差允許范圍內(nèi),穩(wěn)定性良好,提取回收率大于80％。②白藜蘆醇在大鼠體內(nèi)吸收快,達峰時間Tmax為0.236±0.034 h,藥物峰濃度

4、Cmax為1064.996±178.272μg/L,半衰期t1/2為2.839±1.827 h。③白藜蘆醇對大鼠肺和肝臟CYP1A1的IC50值分別為10.10μmol/L和28.26μmol/L。結(jié)論:①本文建立的LC-MS/MS方法特異性好、靈敏度高且樣品預處理簡便,能有效地用于白藜蘆醇在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究。②白藜蘆醇在大鼠體內(nèi)達峰快、血藥濃度相對較低、半衰期較短。③白藜蘆醇能顯著抑制大鼠肺和肝臟CYP1A1酶活性,該作用可能