報告基因法測定重組人促紅素生物學活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、重組人促紅素能夠刺激紅細胞增生、分化和成熟,臨床主要用于治療腎性貧血。目前其生物學活性檢測方法主要是網(wǎng)織紅細胞計數(shù)法,但其操作復雜,周期長。報告基因法由于具有操作簡便,周期短,特異性好,變異度小等優(yōu)點已經(jīng)成為藥物生物學活性檢測領域的研究熱點。
　　本研究的目的是建立一種快速檢測重組人促紅素生物學活性的報告基因法。在UT-7細胞的基礎上,利用重組人促紅素信號通路中的STAT5的DNA核心反應元件SIE,GRR,GAS構建報告基因載體

2、,構建和篩選可穩(wěn)定傳代的活性檢測用的單克隆報告基因細胞株,然后建立報告基因方法并進行相應的方法學驗證,最后對構建好的報告基因細胞株進行細胞檢定。本研究成功構建了重組人促紅素的報告基因單克隆細胞株UT-7/G7,建立的報告基因法可以在24h內完成重組人促紅素的生物學活性測定,新方法對兩批成品檢測的回收率在81.71％~102.44%之間,日內精密度分別為6.6%和7.9%,日間精密度分別為6.0%和7.5%,對34批成品的檢測,證明新方法

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