一個彌漫性掌跖角化病家系KRT1基因突變檢測及突變體功能分析.pdf

1、彌漫性掌跖角化病是一組手掌和足趾發(fā)生過度角化的常染色體顯性遺傳病，現(xiàn)有研究認為該疾病與三個基因相關：定位在12q13的角蛋白KRTI基因和KRT16基因以及定位在17q12-q21的KRT9基因。角蛋白是表皮內最主要的結構蛋白。并且在維持角質細胞形態(tài)中起到重要作用，該基因缺陷會導致遺傳性皮膚病。我們在本室收集的一個常染色體顯性彌漫性掌跖角化病家系中檢測到KRTI基因的突變IA37P，并對其突變后導致的功能變化進行了初步研究。 第

2、一章對一個常染色體顯性彌漫性掌跖角化病家系的候選致病基因進行突變檢測 現(xiàn)有研究表明，常染色體顯性彌漫性掌跖角化病由KRTI基因、KRTl6基因和KRT9基因的突變所致。我們對本室收集的一個常染色體顯性彌漫性掌跖角化病家系進行上述三個侯選基因的突變檢測，通過PCR和直接測序，在KRTl基因中發(fā)現(xiàn)了一個錯義突變T1310C，導致第437位亮氨酸突變?yōu)楦彼酙A37P，該突變與疾病表型共分離，在60個家系外的正常對照中未發(fā)現(xiàn)該變異。因

3、此，我們推測KRTl基因的L437P突變可能是導致該家系發(fā)生彌漫性掌跖角化病的原因。 第二章 KRTl基因突變體的構建和表達分析 為了探明我們發(fā)現(xiàn)的KRTl基因L437P突變與疾病的關系，我們從皮膚cDNA文庫中擴增出KRTl野生型cDNA序列，并采用overlap法擴增出T1310C突變的cDNA序列，分別克隆至pEGFP-N1質粒構成重組質粒，轉染HaCat細胞后用激光共聚焦顯微鏡觀察融合蛋白的綠色熒光表達，野生型的