組織工程血管種子細胞培養(yǎng)和種植的實驗研究.pdf

1、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞是血管組織工程的重要研究對象。現(xiàn)有的在組織工程血管生物材料相容性檢測中應用的成年大鼠主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)難度大，成功率低，限制了其在材料相容性檢測中的應用。因此，為了尋找一種更易獲得的原代血管平滑肌細胞來源，本實驗將取材自24h乳鼠SD大鼠主動脈，4周齡成年SD大鼠主動脈，4周齡成年SD大鼠門靜脈的血管中膜組織用貼塊法做原代培養(yǎng)，并比較細胞游出的結果。結果表明，24h乳鼠SD大鼠主動脈和4周齡SD大鼠門靜脈組織塊

2、可以在培養(yǎng)第3天觀察到游出細胞，而4周齡成年SD大鼠主動脈在觀察的八周內(nèi)未觀察到有細胞游出。取材自乳鼠的主動脈血管較取自成年鼠的主動脈血管更易通過原代培養(yǎng)獲得細胞。取自靜脈的組織塊較取材于動脈的組織塊更易培養(yǎng)成功。
　　 為了探索更加高效的組織貼塊法，本實驗采取保留內(nèi)膜培養(yǎng)方法進行細胞培養(yǎng)，將4周齡大鼠門靜脈做保留內(nèi)膜和刮除內(nèi)膜的培養(yǎng)，結果保留內(nèi)膜的組織培養(yǎng)成功，而刮除內(nèi)膜的培養(yǎng)失敗，表明內(nèi)膜完整性對于細胞游出的重要作用。

3、>　　 乳鼠主動脈平滑肌細胞相對成年鼠動脈平滑肌細胞具有分泌彈性蛋白，組裝彈性纖維的特性，而可應用于有關彈性蛋白的生物材料相容性檢測，本實驗培養(yǎng)了乳鼠主動脈平滑肌細胞至第8周，并觀察細胞的生長特性。
　　 細胞的種植技術是組織工程血管的重要環(huán)節(jié)，管狀支架的幾何構型阻礙了細胞在支架上的黏附和增殖。管狀支架種植的設備國內(nèi)外文獻均有報道，但裝置復雜昂貴，因此，本實驗自制了種植裝置，用PMMA,一次性輸液器部件，三通裝置構建的簡易裝置