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文檔簡介
1、目的:觀察氟伐他汀對溶血磷脂酰膽堿損傷人臍靜脈內皮細胞的保護作用,探討他汀類藥物降脂作用以外的其他抗動脈粥樣硬化機制,為他汀類藥物的臨床應用提供新的依據(jù)。 方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞,待細胞生長到融合狀態(tài)時加入不同濃度(10-7-10-5mol/L)的氟伐他汀孵育20分鐘,然后加入溶血磷脂酰膽堿(5mg/L)作用24小時,用半定量逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測eNOS mRNA、MMP-9 mRNA的表達,免疫細
2、胞染色法檢測NF-KBp65、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表達,流式細胞儀檢測細胞凋亡率,四唑鹽比色實驗(MTT)檢測細胞活力,比色法檢測各組細胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脫氫酶(LDH)的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量的變化。 結果: 1、溶血磷脂酰膽堿能明顯誘導內皮細胞MMP-9 mRNA和NF-KBp65、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表達,抑制eNOS mRNA的表達,
3、降低SOD、GSH的活性、NO的含量和細胞活力,并能明顯增加LDH的活性、MDA的含量以及促進細胞凋亡; 2、預先應用不同濃度的氟伐他汀干預后,可劑量依賴性的抑制上述效應; 3、用一氧化氮合酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)抑制一氧化氮合酶降低NO的合成后,可部分取消氟伐他汀的保護作用。 結論: 1、溶血磷脂酰膽堿可誘導血管內皮細胞產生氧化應激和炎癥反應,導致內皮細胞功能紊亂; 2、氟伐他
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