一氧化氮與心鈉素對豚鼠耳蝸血流的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察豚鼠耳蝸局部心鈉素(ANP)和一氧化氮合酶(NOS)免疫組化反應(yīng)產(chǎn)物的分布,為研究ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸局部血流、淋巴以及神經(jīng)調(diào)節(jié)中的相互作用提供形態(tài)學(xué)依據(jù);初步研究ANP 和一氧化氮(NO)在豚鼠耳蝸血流(CoBF)調(diào)節(jié)中的相互關(guān)系。 方法: (1)采用免疫組織化學(xué)雙標(biāo)法檢測ANP 和NOS 在正常豚鼠耳蝸的分布特征。 (2)采用免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)方法檢測ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸的分布,觀察A

2、NP 和NOS 在同一細(xì)胞內(nèi)的定位特征。 (3)將豚鼠隨機分為:ANP+左旋精氨酸(L-Arg)組、ANP+生理鹽水組、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)+ANP 組、L-NAME+ANP +L-Arg 組及L-NAME+生理鹽水組。經(jīng)腹側(cè)打開聽泡,耳蝸底轉(zhuǎn)鼓階開窗分別給予各組藥物,實驗過程中采用激光多普勒血流量儀監(jiān)測耳蝸血流量。 結(jié)果: (1)免疫組化雙標(biāo)結(jié)果顯示:在耳蝸各轉(zhuǎn)螺旋動脈、血管紋、螺旋緣、螺旋

3、韌帶和Corti 器顯示雙陽性染色;耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及囊斑神經(jīng)細(xì)胞壁及軸突NOS 陽性染色,胞質(zhì)ANP 陽性染色;蓋膜、前庭膜陰性染色。 (2)免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示:蝸軸螺旋動脈和血管紋均發(fā)現(xiàn)ANP 和NOS 雙陽性表達(dá);螺旋緣、螺旋韌帶、Corti 器、耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞ANP 和NOS 雙陽性表達(dá),其中部分耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈ANP 陽性表達(dá)。 (3)局部給予ANP 可引起CoBF 顯著升高,加用L-Arg 會引起血流的進一步

4、升高。L-NAME 可引起CoBF下降,給予ANP 后CoBF 迅速回升。ANP 所引起的血流變化在使用L-Arg之后仍會進一步升高。對照組耳蝸血流可見微弱回升。 結(jié)論:由ANP 和NOS 在內(nèi)耳的定位特點可以推斷,二者在耳蝸局部血流調(diào)節(jié),內(nèi)、外淋巴平衡調(diào)節(jié)以及神經(jīng)信號傳遞等方面可能具有重要作用,二者之間可能存在密切的相互作用機制。ANP 和L-Arg 單獨和聯(lián)合作用可不同程度地增加耳蝸血流量,證明NO 和ANP 在CoBF 自

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