Livin和Survivin在成釉細胞瘤中的表達和意義.pdf

1、目的：
　　成釉細胞瘤(ameloblastomas ABs)是發(fā)生于頜骨內(nèi)的牙源性上皮來源的腫瘤，在國內(nèi)其發(fā)生率約占牙源性腫瘤的60％。腫瘤內(nèi)主要含成釉器樣結(jié)構(gòu)，但無釉質(zhì)或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內(nèi)，常導致頜骨的膨大和面部變形。雖屬良性腫瘤，但其生長具有局部侵襲性，術(shù)后復發(fā)率較高，也有惡變甚至遠處轉(zhuǎn)移的報道。WHO2005年新分類將ABs分為4種臨床病理行為不同的變異型，包括:實性/多囊型、骨外/外周型、促結(jié)締組

2、織增生型和單囊型。這些亞型在患者年齡、部位、影像學表現(xiàn)以及臨床預后等方面均存在差異，以往對于其治療多采用刮除術(shù)，由于其復發(fā)機率較大，所以目前多以擴大切除術(shù)為主，但仍有小部分患者有復發(fā)傾向。鑒于本病至今沒有有效的治療方法，因此研究其發(fā)病機制，尋找抑制腫瘤新的靶點，對預防和治療本病有著較重要的意義。目前對ABs有較多的研究，對其分子生物學方面發(fā)病機制的探討也不斷有報道，由于其是與牙齒發(fā)育有關(guān)的腫瘤，以往研究發(fā)型凋亡抑制蛋白Livin和Sur

3、vivin參與了牙齒發(fā)育的過程，因此推測凋亡抑制蛋白Livin和Survivin可能與ASs發(fā)生有一定相關(guān)性。Livin和Survivin是凋亡蛋白抑制因子IAP家族的重要成員，通過不同的途徑抑制細胞凋亡。以往已證實了Livin和Survivin參與胚胎的發(fā)育和牙齒的發(fā)生，研究發(fā)現(xiàn)Livin和Survivin的異常誘導了腫瘤的發(fā)生，原因是Livin和Survivin誘導了細胞凋亡停止，而細胞增殖，因此產(chǎn)生了異常的新生物。但在成釉細胞瘤的

4、患者中發(fā)生少之又少。因此本實驗擴大樣本量，檢測Livin和Survivin在成釉細胞瘤中的表達，探討成釉細胞瘤發(fā)生發(fā)展中細胞凋亡的作用及其與成釉細胞瘤臨床生物學行為的關(guān)系。
　　方法：
　　實驗標本來自2007年至2012年中國醫(yī)科大學口腔醫(yī)院外科和病理科，新鮮手術(shù)標本-86℃凍存。診斷標準依WHO2005分類標準。采取免疫組化SP法、Western-blot法和逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PC

5、R)法分別檢測ABs中Livin和Survivin蛋白的表達。
　　結(jié)果：
　　一、ABs中Livin免疫組化結(jié)果
　　Livin在ABs中大部分在胞漿表達，偶見胞核表達，以中度陽性強陽性為主，位于ABs的外周層及星網(wǎng)狀層細胞漿中，胞漿陽性為88.7％(71/80)，正常口腔黏膜上皮細胞無表達，在口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)呈陽性表達。
　　二、ABs中Livin蛋白表達結(jié)果
　　用Western-blo

6、t方法，以β-tublin做內(nèi)參，檢測了30例ABs中Livin表達情況。結(jié)果顯示，Livin在ABs(0.87±0.23)中的表達明顯高于正常黏膜(0.60±0.05)中的表達，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)(0.80±0.07)組織中的表達無明顯差別(P＞0.05)。
　　三、ABs中Livin基因mRNA表達結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測了30例ABs

7、中Livin的mRNA表達情況。結(jié)果顯示30例ABs中有18例Livin mRNA表達（陽性率為60％），而10例口腔黏膜鱗狀細胞癌OSCC中有5例Livin mRNA表達（陽性率為50％），10例正常黏膜中僅有2例Livin mRNA表達（陽性率為20％），Livin的表達高于正常黏膜，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　四、ABs中Survivin免疫組化結(jié)果
　　Survivin在ABs中有胞漿的表達，并可見少量的細

8、胞核表達，以中度陽性強陽性為主，位于ABs的外周層及星網(wǎng)狀層細胞漿中，胞漿陽性為90.0％(72/80)，正?？谇火つど掀ぜ毎麩o表達，在口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)呈陽性表達。
　　五、ABs中Survivin蛋白表達結(jié)果
　　用Western-blot方法，以β-tublin做內(nèi)參，檢測了30例ABs中Survivin表達情況。結(jié)果顯示，Survivin在ABs(0.78±0.12)中的表達明顯高于正常黏膜(0.49±0

9、.07)中的表達，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)(0.71±0.08)組織中的表達無明顯差別(P＞0.05)。
　　六、ABs中Survivin基因mRNA表達結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測了30例ABs中Survivin的mRNA表達情況。結(jié)果顯示30例ABs中有20例Survivin mRNA表達（陽性率為66.7％），而10例口腔黏膜鱗狀細胞癌OSCC