胰島素樣生長因子-1對缺氧缺血性腦損傷新生小鼠腦細胞線粒體膜電位的影響.pdf

1、目的:探討胰島素樣生長因子-1(IGF-1)對缺氧缺血性腦損傷(HIBD)急性期新生小鼠腦細胞線粒體膜電位DYm的影響。
　　方法:采用改良Rice方法,將右側頸總動脈永久性結扎后再置8％O2缺氧艙中持續(xù)缺氧2h制備新生小鼠右腦HIBD動物模型。7日齡C57/BL新生小鼠91只隨機分為正常對照組(n=7)、假手術組(n=22)、缺氧缺血(HI)組(n=22)、假手術+IGF-1組(n=18)、HI+IGF-1組(n=22)。正常對

2、照組不做任何處理,假手術組僅分離右側頸總動脈,但不結扎;假手術+IGF-1組、HI+IGF-1組在手術后即刻給予腹腔注射IGF-1(50ug/kg),假手術組、HI組注射等體積生理鹽水,觀察小鼠早期神經行為變化,取五組小鼠各時點腦組織HE染色、Nissl染色觀察病理形態(tài)學改變,術后48h采用干濕法分別測定假手術組、模型組、HI+IGF-1組腦含水量;各組小鼠于術后0、3、6、12、24、48h取大腦皮質、海馬、丘腦,制成單細胞懸液后以羅

3、丹明123(Rhodamin123,Rho123)染色標記,并利用流式細胞儀分別測定各部位腦細胞線粒體膜電位DYm的變化。
　　結果:
　　(1)HI后48h右側腦含水量顯著高于假手術組左、右腦(P<0.01);HI+IGF-1組右側腦含水量明顯低于HI組(P<0.01)。
　　(2)HI+IGF-1組新生小鼠24h后神經行為異常發(fā)生率明顯低于HI組(P<0.01)。
　　(3)HE染色、Nissl染色顯示正常對

4、照組、假手術組、假手術+IGF-1組雙側腦組織和HI組左側腦組織結構無病理改變,HI組右側腦組織出現水腫、變性、凋亡和壞死,大腦皮質、海馬、丘腦分別在術后3、6、12h出現腫脹、凋亡。HI后48h神經元腫脹、變性最為明顯,具有凋亡特征的神經細胞達高峰。HI+IGF-1組右側腦組織水腫、變性、凋亡和壞死均較HI組減輕,具有凋亡特征的神經細胞明顯減少。
　　(4)正常對照組、假手術組、假手術+IGF-1組新生小鼠大腦皮質、海馬、丘腦各

5、部位在不同時間點平均熒光強度無明顯差異(P>0.05)。HI組新生小鼠腦細胞線粒體膜電位DYm的降低最先出現在大腦皮質(術后3h),其次為海馬(術后6h),最后在丘腦(術后12h);HI+IGF-1組各部位腦細胞線粒體膜電位DYm高于HI組(P<0.01)。
　　結論:應用IGF-1干預治療可明顯減輕缺氧缺血造成的腦水腫,降低HIBD后早期神經行為異常發(fā)生率,減少神經細胞凋亡,HIBD新生小鼠腦細胞線粒體膜電位DYm的降低最先出現