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1、本論文首次采用小鼠骨髓來源的巨核細胞作為研究對象,體外觀察hNUDC對于小鼠骨髓細胞巨核的增殖和分化。結(jié)果顯示,在半固體培養(yǎng)基中hNUDC可明顯促進小鼠骨髓中巨核細胞集落生成單位(Colonyformingunitofmegakaryocyte,CFU-MK)的生成;在液體培養(yǎng)基中hNUDC可明顯促進小鼠骨髓中巨核細胞成熟。流式細胞儀測定和免疫熒光染色,進一步確證了hNUDC可顯著增加小鼠巨核細胞CD41+和CD61+細胞的百分含量和細
2、胞核的多倍體化,且hNUDC刺激產(chǎn)生的巨核細胞核多倍體的含量明顯高于TPO。 除了觀察hNUDC對于小鼠骨髓細胞的增殖和分化以外,本論文還研究了hNUDC對于人臍血和外周血來源的CD34+細胞的增殖和分化作用。結(jié)果顯示,在無血清甲基纖維素半固體中,hNUDC能夠促進CD34+細胞分化增殖形成CFU-MK集落。hNUDC還可顯著增加巨核細胞表面標志物CD41+的表達,并且刺激產(chǎn)生高倍性的巨核細胞顯著地多于TPO。hNUDC對人前血小板
3、形成的作用與對小鼠巨核細胞的作用相同?! 榱诉M一步確定hNUDC對巨核細胞發(fā)育的功能及其機制,使用間接免疫熒光染色方法進一步確證了hNUDC在人和小鼠巨核細胞的不同發(fā)育階段和前血小板階段的表達情況。結(jié)果清楚地顯示,hNUDC能夠特異地與Mpl受體相結(jié)合,并且hNUDC還分布于巨核細胞和血小板內(nèi)含顆粒中的微管上?! 】傊?,本論文的結(jié)果明確證明了hNUDC可以激發(fā)許多與TPO相同的生物反應(yīng)。TPO主要作用于巨核細胞分化的早期階段,而h
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