局灶性腦缺血大鼠腦組織比較蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、目的:建立局灶性腦缺血模型，從蛋白質(zhì)整體水平探討腦缺血/再灌注的保護作用機制。 方法:雄性、健康大鼠SD，隨機分為正常組、腦缺血模型組、茅莓總皂苷干預(yù)組和尼莫地平干預(yù)組。參照Koizumi法并加以改進，建立MCAO大鼠腦缺血2h再灌注24h的模型；裂解液提取總蛋白質(zhì)，以雙向電泳技術(shù)進行蛋白質(zhì)分離，考馬斯亮藍染色，獲得雙向電泳圖譜，利用專門的軟件篩選出差異蛋白質(zhì)，用MALDI-TOF-MS獲得肽指紋圖譜，MS-Fit數(shù)據(jù)庫進行搜索

2、，獲得有關(guān)的蛋白質(zhì)信息。 結(jié)果: 1、以正常大鼠腦組織為研究對象，在不同的條件下進行2-DE，所分離得到的蛋白質(zhì)點滿足質(zhì)譜分析的要求。 2、局灶性腦缺血模型組與正常組腦組織的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較，從正常組篩選到23個差異表達蛋白斑點，其中13個低表達，10個高表達，鑒定其中6個蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)白細胞三烯A-4水解酶、促甲狀腺激素釋放激素降解胞外酶等與腦缺血相關(guān)的蛋白質(zhì)。 3、局灶性腦缺血模型組與茅

3、莓總皂苷干預(yù)組的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較，從茅莓總皂苷干預(yù)組從找到了29個差異表達蛋白斑點，其中15個低表達，10個高表達，鑒定其中7個蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)FNF-α、L,TGF-2等與腦缺血相關(guān)的蛋白質(zhì)。 4、局灶性腦缺血模型組與尼莫地平干預(yù)組的比較蛋白質(zhì)組學研究。與模型組比較，從尼莫地平干預(yù)組找到了25個差異表達蛋白斑點，其中10個低表達，15個高表達，鑒定其中6個蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)激肽原-1前體、谷氨酸受體4前體等與腦缺血相關(guān)的