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文檔簡介
1、在人胎盤發(fā)育過程中,滋養(yǎng)層細胞對子宮內(nèi)膜血管的入侵至關重要。滋養(yǎng)層細胞的整個入侵過程是先進入毛細血管、再遷移至子宮螺旋動脈并在此過程中對子宮動脈血管系統(tǒng)進行重構(gòu)。這一遷移過程提示,滋養(yǎng)層細胞的遷移方向是與血液的流動方向相反的,即滋養(yǎng)層細胞是逆血流而上的。為了弄清滋養(yǎng)層細胞在妊娠過程中的生理作用以及入侵子宮脈管系統(tǒng)的機理,學術(shù)界已做了大量卓有成效的工作,但是關于滋養(yǎng)層細胞在血管系統(tǒng)中逆流遷移機制的研究卻極其有限。因此,為了深入了解和認識體
2、內(nèi)滋養(yǎng)層細胞逆血流遷移行為和調(diào)節(jié)機制,本文從細胞粘附分子的角度分析了滋養(yǎng)層細胞β1整合素的表達與其遷移行為的相關性。本論文的具體研究工作和結(jié)論如下:
首先,本文建立了一種簡單穩(wěn)定的人體滋養(yǎng)層細胞原代培養(yǎng)方法。結(jié)果表明:采用胰酶+DNA酶輔助消化的方法可顯著提高原代培養(yǎng)滋養(yǎng)層細胞的產(chǎn)量;同時,通過Percoll非連續(xù)梯度離心以及相應的差速貼壁和機械刮除等純化步驟后得到的滋養(yǎng)層細胞純度相對較高,可達95%以上,且細胞形態(tài)單一,生長
3、穩(wěn)定,細胞活力強。這說明本文采用的方法適合滋養(yǎng)層細胞的分離、純化和體外培養(yǎng)。
本文還采用微管吸吮技術(shù)對滋養(yǎng)層細胞的粘附力學特性進行了研究。結(jié)果表明:滋養(yǎng)層細胞的粘附力隨I型鼠尾膠原濃度的增加而呈顯著的線性增加趨勢,表現(xiàn)出明顯的濃度依賴關系。當與內(nèi)皮細胞接觸時,滋養(yǎng)層細胞表現(xiàn)出較高的粘附力,表明與內(nèi)皮細胞的接觸可顯著增強滋養(yǎng)層細胞的粘附力學行為。此外,本文還從粘附分子的角度對滋養(yǎng)層細胞與膠原和內(nèi)皮細胞的粘附力學特征進行了分析,結(jié)
4、果提示在滋養(yǎng)層細胞的粘附過程中,β1整合素也起著重要的調(diào)節(jié)作用。
最后,本文研究了體內(nèi)絨毛組織和體外培養(yǎng)的滋養(yǎng)層細胞整合素表達的特性。結(jié)果表明:β1整合素在遷移顯型滋養(yǎng)層細胞上高度表達。在剪切應力作用下,滋養(yǎng)層細胞β1整合素的表達隨剪切應力作用的時間的延續(xù)而顯著變化,剪切應力增強了滋養(yǎng)層細胞β1整合素的表達。當滋養(yǎng)層細胞與內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)時,β1整合素的表達較單獨培養(yǎng)時顯著增強。這些結(jié)果提示,β1整合素在滋養(yǎng)層細胞對內(nèi)皮細胞的粘
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