脈沖射頻大鼠CCI模型背根神經(jīng)節(jié)對脊髓小膠質(zhì)細胞IRF8表達的影響.pdf

1、【目的】
　　本研究選用結扎大鼠一側坐骨神經(jīng)主干制備慢性坐骨神經(jīng)縮窄損傷（CCI）模型，通過一般行為學、50％機械刺激縮爪反應閾值(50%MWT)、熱輻射刺激縮爪反應潛伏期(TWL)觀察判斷對大鼠背根神經(jīng)節(jié)（DRG）進行脈沖射頻（PRF）治療及鞘內(nèi)注射干擾素調(diào)節(jié)因子8（IRF8）反義寡核苷酸是否具有緩解疼痛的作用，并通過Western-Blot、免疫組化（IHC）法檢測大鼠脊髓組織中IRF8、離子鈣接合蛋白Iba1表達來闡述脈沖射

2、頻背根神經(jīng)節(jié)緩解疼痛的可能機制。
　　【方法】
　　第一部分脈沖射頻大鼠CCI模型背根神經(jīng)節(jié)對痛閾和脊髓IRF8表達的影響
　　采用大鼠CCI模型，于造模后第7天行背根神經(jīng)節(jié)脈沖射頻治療。造模前，造模后1、3、5、7天，脈沖射頻后1、7、14天，通過觀察一般行為學，50%MWT、TWL檢測大鼠痛覺改變。造模后7天，脈沖射頻后7、14天，Western-Bolt、IHC法檢測IRF8蛋白水平。
　　第二部分鞘內(nèi)注射

3、IRF8反義ODN對大鼠CCI模型痛閾和脊髓IRF8、Iba1表達的影響
　　建立鞘內(nèi)置管和CCI模型，于造模后12h分別進行鞘內(nèi)注射IRF8反義ODN、IRF8錯義ODN、等體積NS，每天1次，共6天。造模前，造模后1、3、5、7、10、12、14天大鼠實施一般行為學、50%MWT，TWL測定。造模后第7、14天采用Western-Blot法檢測IRF8、Iba1蛋白表達。
　　【結果】
　　1、與Sham組比，CC

4、I組、CCI+PRF組、CCI+NPRF組大鼠于神經(jīng)損傷后右后爪50%MWT和TWL均顯著降低(P<0.01)，同時脊髓IRF8蛋白表達上調(diào)(P<0.05)。脈沖射頻后1、7、14天 CCI+PRF組與治療前比較50%MWT和TWL升高(P<0.01)，并顯著高于CCI組和CCI+NPRF組(P<0.01)，但仍低于Sham組(P<0.01)，脊髓IRF8蛋白的表達則相應減少(P<0.05)。
　　2、與Sham組比較，NS組、M

5、M組大鼠神經(jīng)損傷后右后爪50%MWT和TWL均顯著降低(P<0.01)，脊髓IRF8、Iba1蛋白表達則增強(P<0.05)。AS組與Sham組相比于CCI后第10天起右后爪50%MWT和TWL下降(P<0.01)，但仍明顯高于MM組、NS組(P<0.01)。CCI后第7、14天IRF8、Iba1蛋白表達，AS組較MM組、NS組顯著減弱(P<0.05)，但仍強于Sham組(P<0.05)。AS組第14天IRF8、Iba1蛋白較第7天增強