氨磷汀對宮頸癌Hela細(xì)胞放射增殖動力學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的：宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤。放射治療是宮頸癌的重要治療手段，配合手術(shù)和化療能長期存活。但放化療的毒副作用會影響到治療的完成。氨磷汀是廣譜細(xì)胞保護(hù)劑，通過清除自由基、保護(hù)細(xì)胞膜和DNA選擇性保護(hù)正常組織。美國FDA批準(zhǔn)用于防護(hù)順鉑化療腎毒性及頭頸部放療的口腔反應(yīng)，但因不能排除對宮頸癌細(xì)胞的保護(hù)作用，不推薦用于宮頸癌的治療。本試驗(yàn)通過體外觀察氨磷汀在宮頸癌細(xì)胞被射線照射后細(xì)胞增殖動力學(xué)的影響，探討氨磷汀作為放射保護(hù)劑作

2、用機(jī)制，為氨磷汀在宮頸癌放化療中應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。
　　 方法：利用MTT法觀察氨磷汀對宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖影響。應(yīng)用細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察氨磷汀對宮頸癌Hela細(xì)胞放射敏感性的影響。流式細(xì)胞儀技術(shù)分析單用氨磷汀和氨磷汀聯(lián)合6MV-X射線照射照射對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖周期和凋亡的影響。隨機(jī)設(shè)置單純藥物組、單純放射組(R)和放射+藥物組(D+R)進(jìn)行克隆形成實(shí)驗(yàn)并繪制存活曲線。隨機(jī)設(shè)置對照組(C)、藥物組(D)、單純放射組

3、(R)和放射+藥物組(D+R)分別于處理后用流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞周期和凋亡情況。
　　 結(jié)果：1.MTT法檢測結(jié)果顯示，分別用氨磷汀(25、50、100、200、400、6000μg/ml)作用于宮頸癌Hela細(xì)胞24和48小時后，細(xì)胞增殖無明顯影響。2.用克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制的存活曲線及相關(guān)參數(shù)顯示，放射+藥物組各個參數(shù)都相應(yīng)小于單放組，單放組D0值(平均致死量)稍小于放射+藥物組，說明加入氨磷汀培養(yǎng)后宮頸癌Hela細(xì)胞對放

4、射的敏感性稍有增加，而且Dq值的減少提示氨磷汀能夠降低宮頸癌Hela細(xì)胞對射線亞致死損傷修復(fù)的能力。3.流式細(xì)胞技術(shù)檢測各組宮頸癌Hela細(xì)胞周期顯示氨磷汀作用24小時Hela細(xì)胞出現(xiàn)G1期阻滯，72小時后出現(xiàn)G2期阻滯。凋亡結(jié)果顯示：單藥組為3.41％、4.36％、5.56％。單純放療組為：4.13％、5.37％、9.72％。藥物+照射組：5μg/ml為5.41％、6.20％、12.04％；10μg/ml為7.63％、8.93％、13