負性情緒積累加速D-gal衰老大鼠認知衰退的神經內分泌機制研究.pdf

1、目的：通過改進不可預知性心理應激誘導大鼠的慢性負性情緒應激，從行為學、生物化學、形態(tài)學等多角度觀察慢性負性情緒應激對 D-半乳糖（D-gal）衰老大鼠認知功能的影響，初步探討慢性負性情緒應激對 D-gal大鼠認知功能的影響及神經內分泌機制，為老年認知功能障礙的防治提供病因學證據(jù)，并為肝主疏泄和七情內傷學說增添新認識。
　　方法：選用 Wistar大鼠70只，雌雄各35只，雄鼠體重為360±10g，雌鼠體重為300±10g，SPF級

2、3月齡，按照曠場實驗結果分為空白對照組、D-gal衰老及腦老化組（簡稱 D-gal組）、慢性負性情緒應激組（簡稱應激組）、D-gal+慢性負性情緒應激組（簡稱應激 D-gal組），每組14只，雌雄各半，其余為攻擊鼠。采用頸背部皮下多點注射 D-gal法（1ml/100g），對 D-gal組和應激 D-gal組復制衰老大鼠模型，1次/天，連續(xù)42天；自第15天起，采用改進的不可預知性心理應激方法誘導應激組和應激 D-gal組的負性情緒（單

3、一或復合出現(xiàn)的負性情緒），每天1種，隨機出現(xiàn)，連續(xù)4周。第37天至42天采用 Morris水迷宮法觀察各組大鼠空間學習記憶能力的變化，應激前及結束后（實驗第43天）采用曠場實驗法對各組大鼠進行行為學觀察，并測定各組大鼠的糖水消耗量、24小時攝食量，實驗第44至46天檢測各組大鼠視覺、聽覺、嗅覺功能。第47天取材并檢測以下指標：①血漿激素水平：促腎上腺皮質激素（ACTH）、皮質酮（CORT）；②血漿單胺類神經遞質：5-羥色胺（5-HT）、

4、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）；③觀察大鼠大腦皮質、海馬的組織形態(tài)學變化。
　　結果：
　　1.復制 D-gal衰老及腦老化大鼠模型。
　　1.1 Morris水迷宮實驗：D-gal組尋臺時間較空白對照組延長。
　　1.2大腦皮質、海馬的組織形態(tài)學變化：D-gal組大腦皮質、海馬組織形態(tài)的擬老化改變與老齡動物一致。
　　2.慢性負性情緒應激加速 D-gal大鼠感官功能的衰退：嗅覺功能減退，視聽覺無顯著

5、性差異。
　　2.1聽覺震驚實驗：應激 D-gal組聽覺震驚反射采樣期加速度與 D-gal組比較，無顯著性差異。
　　2.2埋藏食物小球實驗：應激 D-gal組找到食物小球時間較 D-gal組延長。
　　2.3視覺懸崖實驗：應激 D-gal組視覺懸崖回避時間與 D-gal組比較，無顯著性差異。
　　3.慢性負性情緒應激加速 D-gal大鼠學習記憶能力的衰退：應激 D-gal組Morris水迷宮尋臺時間較 D-ga

6、l組延長。
　　4.慢性負性情緒應激升高D-gal大鼠下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸功能相關激素：應激 D-gal組血漿 ACTH、CORT水平較 D-gal組升高。
　　5.慢性負性情緒應激引起 D-gal大鼠血漿單胺類神經遞質的變化：應激D-gal組較 D-gal組血漿 NE水平、DA水平升高、5-HT水平下降。
　　6.應激D-gal組大腦皮質、海馬的組織學改變較D-gal組的擬老化改變加重。
　　結論：