銀杏葉提取物的毒理學(xué)初步研究.pdf

1、銀杏屬裸子植物銀杏科，為落葉喬木，被稱為“植物界的熊貓”和“活化石”。銀杏葉的藥用價(jià)值極高，具有抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、降血壓、降血脂、促進(jìn)組織再生等作用被廣泛用于畜牧養(yǎng)殖、醫(yī)療保健、食品工業(yè)、日化工業(yè)等眾多領(lǐng)域。本試驗(yàn)主要研究了銀杏葉提取物的毒理學(xué)特性，為銀杏葉提取物在獸醫(yī)臨床的應(yīng)用提供相關(guān)依據(jù)。
　　銀杏葉提取物小鼠急性毒性試驗(yàn)
　　試驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定銀杏葉提取物小鼠經(jīng)口給藥的LD50值及其95%置信區(qū)間。試驗(yàn)方法：SPF級(jí)

2、CD1小鼠50只，雌雄各半，銀杏葉提取物用0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）助懸制備成均勻穩(wěn)定的混懸液，以20mL/kg的給藥體積經(jīng)口給藥。記錄給藥后14天內(nèi)動(dòng)物的中毒情況和死亡情況。試驗(yàn)結(jié)果：改良寇氏法計(jì)算銀杏葉提取物的LD50值為13429 mg/kg，95%的置信區(qū)間為12228 mg/kg~15098 mg/kg，依據(jù)化合物急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)銀杏葉提取物屬于實(shí)際無毒物質(zhì)。
　　銀杏葉提取物的大鼠亞慢性毒性試驗(yàn)
　

3、　試驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定銀杏葉提取物大鼠經(jīng)口給藥的亞慢性毒性。試驗(yàn)方法：SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各40只，銀杏葉提取物用用0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）助懸制備成均勻穩(wěn)定的混懸液，給藥體積20mL/kg，給藥劑量0 mg/kg，200 mg/kg,1000 mg/kg，4000 mg/kg，連續(xù)30天經(jīng)口給藥。記錄動(dòng)物的臨床癥狀、生長狀況、食物消耗量、血常規(guī)指標(biāo)、血生化指標(biāo)、尿液分析、病理組織學(xué)觀察等評(píng)價(jià)銀杏葉提取物的的亞慢性毒性強(qiáng)度。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:各組試驗(yàn)大鼠一般狀況良好，未出現(xiàn)明顯的中毒癥狀及死亡，體重、飼料利用率、血液學(xué)及生化指標(biāo)、臟器系數(shù)及組織病理學(xué)檢查也未見明顯異常。受試銀杏葉提取物是安全的，可以長期服用。
　　銀杏葉提取物的細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)
　　試驗(yàn)?zāi)康模簯?yīng)用鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)方法，在添加和不添加體外代謝活化系統(tǒng)（S9）的條件下檢測(cè)銀杏葉提取物的致突變作用，評(píng)價(jià)其潛在的遺傳毒性。試驗(yàn)方法：平皿摻入法，選擇 TA97a，TA98，TA100，

5、TA102，TA1535作為試驗(yàn)菌株，試驗(yàn)劑量128μg/皿、320μg/皿、800μg/皿、2000μg/皿、5000μg/皿，同時(shí)設(shè)置溶媒對(duì)照組（丙酮）、銀杏對(duì)照（純凈水）和陽性對(duì)照組，每個(gè)處理做3個(gè)平行，記錄各平皿的會(huì)變菌落數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果：在有或無代謝活化系統(tǒng)（S9）時(shí)，測(cè)試菌株TA1535的供試品組回變菌落數(shù)平均值總小于溶劑對(duì)照組平均值的3倍，其他測(cè)試菌株供試品組回變菌落數(shù)平均數(shù)等于或大于溶劑對(duì)照組平均值的2倍，試驗(yàn)結(jié)果呈陰性，銀

6、杏葉提取物對(duì)所有試驗(yàn)菌株均無致突變性。
　　銀杏葉提取物的骨髓微核試驗(yàn)
　　試驗(yàn)?zāi)康模簯?yīng)用哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)檢測(cè)銀杏葉提取物引起小鼠成紅細(xì)胞染色體損傷或有絲分裂器的損傷，評(píng)價(jià)其潛在的遺傳毒性。試驗(yàn)方法：SPF級(jí)CD1小鼠，雌雄各30只，隨機(jī)分為三組，受試物銀杏葉提取物分別按125 mg/Kg，250 mg/Kg和500 mg/Kg的劑量水平對(duì)三組給藥組動(dòng)物進(jìn)行經(jīng)口給藥。設(shè)一組作為對(duì)照組接受空白溶劑（純水），另設(shè)助溶劑對(duì)照

7、組接受羧甲基纖維素鈉（CMC-Na），設(shè)一組作為陽性對(duì)照組接受環(huán)磷酰胺40 mg/Kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)所有存活的動(dòng)物在給藥24小時(shí)后實(shí)施安樂死并解剖，取兩側(cè)股骨骨髓進(jìn)行骨髓涂片，在經(jīng)固定、染色和封片后進(jìn)行閱片檢查。試驗(yàn)結(jié)果：在本試驗(yàn)條件下銀杏葉提取物未誘發(fā)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率增高，結(jié)果為陰性，表明銀杏葉提取物無致突變作用。
　　以上實(shí)驗(yàn)均按照我國農(nóng)業(yè)部頒布的《新獸藥一般毒性試驗(yàn)技術(shù)要求》和《新獸藥特殊毒性試驗(yàn)技術(shù)要求》設(shè)計(jì)進(jìn)行