直接腎素抑制劑對大鼠急性胰腺炎的保護作用及機制的實驗研究.pdf

1、目的:觀察直接腎素抑制劑（阿利吉侖）在大鼠急性胰腺炎(Acutepancreatitis，AP)模型中對大鼠的血清淀粉酶（serum amylase，AMY）、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、血漿腎素活性（plasma renin activity，PRA）、血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)水平的影響，以及其對大鼠胰腺組織中核因子-κB(nuclear factor ka

2、ppa-B，NF-κB)和血管緊張素Ⅱ1型受體(AngiotensinⅡ type1 receptor，AT1R)表達的影響，探討抑制腎素-血管緊張素系統(tǒng)(ReninAngiotensin System，RAS)起始環(huán)節(jié)對大鼠急性胰腺炎的保護作用及可能機制。
　　方法:72只成年健康Spague-Dawlay(SD)大鼠隨機分為三組:假手術組（SO組，n=24）、急性胰腺炎組（AP組，n=24）、阿利吉侖（銳思力，Rasilez）

3、治療組（R組，n=24），每組各共計24只。AP組和R組大鼠急性胰腺炎模型均采用3.5％牛磺膽酸鈉（0.1ml/100g）逆行胰膽管注射制備。而SO組僅開腹稍翻動腸管和胰腺后關腹。R組于造模后立即給予阿利吉侖（銳思力）溶液灌胃(20mg/ kg)，SO組及AP組在造模后，給予同等劑量的生理鹽水灌胃。各組大鼠于術后6h，12h，24h，分批次等數(shù)量（8只/組/批）下腔靜脈抽血后處死。各組大鼠分別取胰腺組織進行蘇木精-伊紅染色（Haemat

4、oxylin and eosin stain，HE），觀察胰腺病理改變和進行病理學評分;下腔靜脈血離心后測定各組大鼠AMY、TNF-α、AngⅡ、PRA的變化;免疫組化方法觀察胰腺組織AT1R、NF-κB的表達情況。所有實驗數(shù)據(jù)用SPASS13.0統(tǒng)計軟件進行分析。
　　結果:1.胰腺組織病理改變:(1)肉眼觀:SO組大鼠胰腺呈粉紅色、質軟、光澤度好，且隨著時間延長未見明顯水腫，未見出血壞死，腹腔內無腹水及皂化斑，三個時間點大鼠胰

5、腺未見明顯變化。AP組在造模后隨即可見沿胰膽管走形區(qū)域出現(xiàn)充血、水腫，范圍逐漸加大，顏色逐漸加深。隨著時間延長，6h大鼠胰腺腫脹明顯、色澤變淡、呈暗紅色，無光澤，少量腹水及胰腺表面皂化斑的形成;12h可見大鼠胰腺出血壞死、呈暗褐色，胰腺及網膜皂化斑的增多，且胰腺與相鄰臟器粘連明顯，胃腸脹氣亦明顯，同時可見較多血性腹水形成;24h大鼠胰腺呈暗褐色，廣泛的壞死出血及鈣化灶形成，與周圍臟器大量粘連，胃腸淤張脹氣更為明顯，可見大量血性腹水。R組

6、各時間點與AP組同一時間點相比，胰腺水腫、出血、壞死、皂化斑的形成及腹水量均減輕。(2)光鏡下觀:SO組胰腺小葉結構基本完整，間質輕度水腫，少量炎性細胞浸潤，且三個時間點胰腺組織鏡下所見無明顯差異。AP組6h胰腺小葉結構紊亂、間質水腫，小葉間隔稍增寬，有炎癥細胞浸潤;12h可見胰腺小葉結構明顯紊亂、間質明顯水腫，小葉間隔明顯增寬,部分小葉結構破壞，片狀壞死、出血，大量炎癥細胞浸潤;24h可見胰腺病理損傷程度加重，小葉結構消失，大量炎細胞

7、浸潤，呈現(xiàn)大片狀出血、壞死，部分見脂肪液化壞死及腺泡細胞固縮、崩解，部分小葉甚至成為一片紅染的無結構區(qū)。R組與AP組同一觀察時間點病理變化大體類似，但胰腺小葉間隔、炎細胞浸潤、出血、壞死等病變程度減輕。2.胰腺組織病理學評分:與SO組比較，AP組各時間點胰腺組織病理評分顯著升高(P＜0.05);而R組各時間點較AP組有明顯降低(P＜0.05)，但仍高于SO組(P＜0.05)。3.AMY、TNF-α、AngⅡ、PRA的變化:與SO組比較，

8、AP組各個時間點，上述指標顯著升高(P＜0.05);而R組各時間點較AP組有明顯降低(P＜0.05)，但仍高于SO組(P＜0.05)。4.胰腺組織中NF-κB和AT1R的表達:SO組各時間點NF-κB和AT1R的表達很少;與AP組、R組各時間NF-κB和AT1R的表達較SO組明顯的升高(P＜0.05);R組各時間NF-κB和AT1R的表達低于AP組(P＜0.05)。
　　結論:1.直接腎素抑制劑（阿利吉侖）對大鼠急性胰腺炎的炎癥病

9、變及損傷具有一定保護作用;2.AngⅡ為RAS的主要效應分子，可以激活NF-κB炎癥信號轉導通路，促進TNF-α等炎癥介質的合成和釋放，在急性胰腺炎的病損過程中起著重要作用;3.活性腎素作為RAS首位環(huán)節(jié)限速酶，其對RAS主要活性分子AngⅡ的生成起著重要調控作用，直接腎素抑制劑（阿利吉侖）可以通過抑制該酶的催化活性減少AngⅡ的生成，弱化AngⅡ的病損作用;4.腎直接素抑制劑（阿利吉侖）也可能直接減少NF-κB的表達，抑制炎癥信號通路