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文檔簡介
1、目的:丘腦前核(anterior thalamic nuclei,ATN)是位于間腦背側丘腦前部的重要聯絡性核團,是Papez回路的重要組成部分,由三個亞核組成,分別為丘腦前核背側核(AD),丘腦前核腹側核(AV)及丘腦前核內側核(AM)。已有實驗證明丘腦前核背側核及丘腦前核腹側核在學習記憶過程中同樣發(fā)揮積極作用,但對于其參與學習記憶機制的研究還很少。本研究旨在通過應用免疫組化技術觀察Morris水迷宮訓練建模成功大鼠的丘腦前核蛋白激酶
2、A催化亞基β(PKA-Cβ)的表達探討其在丘腦前核學習記憶中的可能作用,進一步揭示丘腦前核在學習記憶中從發(fā)揮作用的相關分子機制。
方法:本實驗采用30只成年雄性Wistar大鼠,體重200-250g,隨即分配至實驗組與對照組。實驗組經5天Morris水迷宮實驗建模形成空間記憶,對照組單純給予相同條件的環(huán)境刺激但不給予學習記憶訓練。于第5天空間探索試驗后兩小時內行4%多聚甲醛心臟灌流,固定,取腦,4℃過夜。次日用免疫組織化學染色
3、(immunohistochemistry,IHC)方法觀察大鼠丘腦前核內蛋白激酶A催化亞基β的表達及分布情況,顯微拍照并行圖片分析。Morris水迷宮行為學實驗數據及照片分析數據均使用SPSS軟件進行單因素方差分析,P<0.05為差異有統計學意義。
結果:Morris水迷宮行為學實驗中,通過對實驗組大鼠第三天和第五天的獲得性訓練試驗及第六天的空間探索實驗的逃避潛伏期行數據分析,發(fā)現第五天與第三天的逃避潛伏期相比明顯縮短(P<
4、0.05),第五天與第六天的逃避潛伏期間沒有顯著差異。免疫組化染色中,光鏡下可見蛋白激酶A催化亞基β在實驗組大鼠丘腦前核內的細胞核及神經纖維中較清晰的表達。通過對陽性表達產物的平均光密度值分析,實驗組表達強于對照組,有顯著差異(P<0.05);實驗組AD區(qū)表達弱于AV區(qū),有顯著差異(P<0.05);對照組AD區(qū)與AV區(qū)差異不顯著(P>0.05)。
結論:在學習記憶過程中大鼠丘腦前核內蛋白激酶A催化亞基β的表達增加,提示丘腦前核
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