全氟化碳汽化吸入對原發(fā)肺沖擊傷犬生物學作用及機制的初步探討.pdf

1、研究背景及目的:原發(fā)肺沖擊傷(Primary blast lung injury,BLI)是導致急性呼吸窘迫綜合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)的重要病因,是一種特殊表現(xiàn)類型的ARDS。BLI傷情復雜,致死致殘率高,目前治療方法有限。全氟化碳(perfluorocarbon,PFC)通過改善氧合、抑制肺臟炎癥反應而改善ARDS的預后。但應用PFC汽化吸入治療BLI還未見文獻報道。為此

2、我們通過建立原發(fā)肺沖擊傷犬模型,探討PFC汽化吸入對犬肺沖擊傷的生物學作用及可能機制,為肺沖擊傷的治療提供理論依據(jù)。
　　方法:選取健康雜種犬36只(雌雄不限),隨機分為4組:①正常對照組(C組):不予沖擊波致傷。②單純肺沖擊傷組(B組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI模型。③肺沖擊傷機械通氣組(BM組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI模型后,常規(guī)機械通氣。④肺沖擊傷PFC汽化吸入通氣組(BMP組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI

3、模型后,常規(guī)機械通氣基礎上予PFC汽化吸入。實驗期間觀察7.5小時,每1小時抽取靜脈血、動脈血及記錄血氣、呼吸力學、血流動力學指標變化,實驗結(jié)束后留取支氣管肺泡灌洗液及肺臟組織行病理檢查和分子生物學檢測。(1)采用小型沖擊波發(fā)生器建立原發(fā)肺沖擊傷犬動物模型,觀察肺沖擊傷犬肺組織形態(tài)學、生理學指標的變化。(2)觀察四組實驗犬肺組織形態(tài)學、氧合、呼吸力學、血流動力學的變化;血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6、TNF-α的含量及表達變化;血漿、

4、肺組織勻漿液 MDA含量、SOD、GSH-PX活力的變化;肺組織凋亡陽性細胞光密度值,肺組織Bax、Bcl-2、Caspase-3活性的表達變化。(3)檢測四組實驗犬肺組織NF-κB、Nrf2、MAPK的表達變化;應用miRNA芯片篩選PFC汽化吸入作用BLI犬差異表達的miRNA及其靶基因。
　　結(jié)果:1.小型沖擊波發(fā)生器致犬肺沖擊傷后,氧合下降;肺組織水腫明顯;病理改變加重。2.與C組比較,B組血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6

5、、TNF-α的含量升高、表達上調(diào);血漿、肺組織勻漿液中MDA含量升高、SOD、GSH-PX活力降低;肺組織細胞凋亡功能增強,抗凋亡蛋白表達降低,Caspase-3活性增強。與B組比較, BMP組氧合上升;肺水腫減輕;病理改變好轉(zhuǎn);血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6、TNF-α的含量降低、表達下調(diào);血漿、肺組織勻漿液中MDA含量降低、SOD、GSH-PX活力增強;肺組織細胞凋亡功能降低,抗凋亡蛋白表達增強,Caspase-3活性降低。與BM

6、組比較,BMP組氣道阻力降低,靜態(tài)順應性改善。3.與C組比較,B組肺組織中NF-κB、Nrf2、MAPK活性表達增強;與B組比較,BMP組肺組織NF-κB、胞漿Nrf2、MAPK的活性表達降低,胞核Nrf2、HO-1活性表達明顯增強。miRNA芯片篩選PFC作用于BLI犬肺組織差異表達的miRNA23條及其靶基因449個。
　　結(jié)論:1.通過小型沖擊波發(fā)生器致傷犬的方法,成功建立了肺沖擊傷犬動物模型。2.全氟化碳汽化吸入能夠改善肺