惡性腦膠質(zhì)瘤自殺基因治療優(yōu)化方案的初探.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文惡性腦膠質(zhì)瘤自殺基因治療優(yōu)化方案的初探姓名：黃強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師：浦佩玉2001.5.1天津匠平} 大掌博士茸啦論文天，給藥1 4 天。( 3 ) T G F 組：顱內(nèi)接種C 6 細(xì)胞后五天于原位立體定向多點(diǎn)注射A d C M V - T K 4 0 t ll ，兩天后腹腔注射G C V ( 更昔洛韋) ，3 0 m g ／k g ／天，給藥1 4 天。( 4 ) T A 組：顱內(nèi)接種c

2、 6 細(xì)胞后五天于原位立體定向多點(diǎn)注射a d C M ' V - T K4 0 u l ，兩天后腹腔注射A C V ( 阿昔洛韋) ，1 0 0 m g ／k g ／天，給藥1 4 天。觀察大鼠的生存期和病理組織學(xué)變化，采用M R I 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)顱內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)。采用T U N E L 法檢測(cè)體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤細(xì)胞或標(biāo)本的細(xì)胞凋亡。原位雜交鑒定轉(zhuǎn)導(dǎo)t l ( 基因的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果；M O I = 1 0 時(shí)C 6 細(xì)胞的t l 【

3、轉(zhuǎn)導(dǎo)率為5 0 ％；M O I = 1 0 0 時(shí)c 6 細(xì)胞的t l 【轉(zhuǎn)導(dǎo)率為1 0 0 ％。A d C M V - T K 轉(zhuǎn)導(dǎo)C 6 細(xì)胞可使c 6 細(xì)胞對(duì)G C V ／A C V 的敏感性顯著性提高，M O I = 1 0 時(shí)G C V 的t k 轉(zhuǎn)導(dǎo)C 6 細(xì)胞D ，。約為野生型c 6 細(xì)胞的2 0 倍；M O I = 1 0 0 時(shí)，G C V 的t l 【轉(zhuǎn)導(dǎo)c 6 細(xì)胞D 。約為野生型c 6 細(xì)胞的1 0 0 0 倍。

4、而M O I = 1 0 時(shí)A C V 的t l ( 轉(zhuǎn)導(dǎo)c 6 細(xì)胞D 。約為野生型C 6 細(xì)胞的5 倍，M O I = 1 0 0 時(shí)A C V 的t k 轉(zhuǎn)導(dǎo)c 6 細(xì)胞D ，。約為野生型c 6 細(xì)胞的1 5 0 倍。H S V - T K 轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞對(duì)G C V 的敏感性明顯高于A C V 。A d C M V - T K 轉(zhuǎn)導(dǎo)的C 6 細(xì)胞對(duì)G C V ／A C V 的敏感性呈劑量依賴性，時(shí)間依賴性及A d C M V - T

5、K 重復(fù)感染率依賴性的。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果：兩對(duì)照組( n - 1 0 ) 中位生存期為1 6 天。T A 組( n = 9 ) 鼠的中位生存期為2 6 天，T G F 組5 ／7 只鼠均生存超過(guò)1 2 0 天。另兩只鼠分別于6 4天和8 7 天死于其他原因。經(jīng)l o g r a n k 檢驗(yàn)：對(duì)照組之間生存期無(wú)差別( p > o ．0 5 ) ，T G F 組和T A 組與兩個(gè)對(duì)照組、T G F 組與T A 組生存期之間存在顯著性差別

6、( p < O0 0 1 ) 。M R I 示T G F 組顱內(nèi)腫瘤約于8 周時(shí)消失。腺病毒中介的t l d G C V 系統(tǒng)抑瘤效果明顯好于t l d A C V 系統(tǒng)，t l d G C V 系統(tǒng)可獲1 0 0 ％的腫瘤根除率，t k ／A C V 系統(tǒng)也可延長(zhǎng)荷瘤鼠的生存期。廣、一1第二部分：腺病毒介導(dǎo)的p 5 3 優(yōu)化惡性膠質(zhì)瘤自殺基因療效的體內(nèi)、外研究j本研究旨在評(píng)價(jià)以腺病毒介導(dǎo)的p 5 3 對(duì)t k ／G C V ／A

7、 C V 自殺基因治療體內(nèi)、外療效的作用。( 體外實(shí)驗(yàn)：以不同重復(fù)感染率( M O I ) = 0 ，1 0 ，5 0 ，1 0 0 ，5 0 0 的A d C M V - p 5 3感染鼠C 6 膠質(zhì)瘤細(xì)胞；以不同重復(fù)感染率( M O I ) = 1 0 ( T P G l ) ，1 0 0 ( T P G 2 )的A d C M V - p 5 3 和M O I = 1 0 0 的A d C M V ．t k 感染C 6 細(xì)胞后，加