養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘臨床研究及對便秘模型小鼠結腸ICC的影響.pdf

1、便秘的危害是漸進的，不易引起醫(yī)生及患者重視，但長期頑固性便秘對人體的危害是不容忽視的。人們普遍的慣性思維認為便秘僅僅是大便干硬難出，事實上便秘與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。隨著飲食結構的改變及精神心理和社會因素的影響，便秘已嚴重影響了現(xiàn)代人的生活質量；且在結腸癌、肝性腦病、乳腺疾病、早老性癡呆等疾病的發(fā)生中有重要作用；在急性心肌梗死、腦血管意外等癥時便秘可導致生命意外；便秘和部分肛腸疾病有密切的關系，如痔、肛裂等。因此，早期預防和合理治

2、療便秘將會大大減輕便秘帶來的嚴重后果和社會負擔。隨著現(xiàn)代生活水平的提高，人們對生活質量的期望越來越高，對于既往常被忽視的一些功能性疾病更加重視。生活方式的改變、飲食結構的變化使得便秘發(fā)病率逐漸升高，尤以老年及經產女性居多。流行病學資料顯示，從美國的幾個全國性調查數(shù)據(jù)中得出美國便秘的發(fā)病率為2％，即大約有4百萬美國人患有便秘，每年有2-3百萬人應用瀉劑輔助排便，且便秘患病率隨年齡的增大而增加。我國的流行病學資料顯示各地區(qū)發(fā)病率有所差異，但

3、都高于2％水平。
　　 治療便秘的藥物較多，但大多難收持久療效，且長期應用易導致藥物依賴及副作用發(fā)生機率增加。祖國醫(yī)學對于便秘的治療積累了豐富的經驗，認為慢性功能性便秘有虛實之分，臨床發(fā)現(xiàn)頑固性便秘以虛秘為主，虛秘中以血虛便秘居多，尤以老年及多產女性更為明顯。血虛便秘多病程較長，臨床癥狀頑固，治療效果欠佳。導師李國棟教授經多年實踐，參詳古今，認為血虛便秘治療療效不佳的原因是血瘀病理常常被忽視，中醫(yī)有“久病多瘀”、“久病入絡”之說

4、，慢性血虛便秘因病程遷延，導致腸壁絡脈瘀阻，腸道微循環(huán)障礙，影響腸壁營養(yǎng)，出現(xiàn)腸道動力紊亂。洞察醫(yī)理，導師治療慢性血虛便秘在養(yǎng)血潤腸的基礎上投以活血化瘀之品，創(chuàng)養(yǎng)血活血方。
　　 頑固性便秘之所以療效不盡如人意，因為現(xiàn)代醫(yī)學對便秘的病因、發(fā)病機制尚未完全清楚。研究者們在不斷進行著有益的探索，認為功能性便秘患者存在結腸動力紊亂，結腸平滑肌病變，結腸神經叢及神經遞質異常，結腸粘膜水通道蛋白表達異常。盡管如此，仍不能完全闡釋便秘的發(fā)病

5、機制。隨著對ICC研究的深入，其在胃腸動力障礙性疾病中作用越來越受到重視。
　　 便秘是臨床常見疾病，也是多種疾病常見的癥狀之一，可分為原發(fā)性便秘和繼發(fā)性便秘。本研究的內容即指原發(fā)性功能性便秘。
　　 原發(fā)性頑固性功能性便秘治療困難，需長期反復用藥，長期反復應用瀉劑，可加重腸壁損害，導致便秘癥狀更加頑固。促動力藥物因可導致惡性心血管事件，亦為臨床少用。李國棟教授總結多年治療頑固性便秘的經驗創(chuàng)養(yǎng)血活血方治療血虛型頑固性便秘

6、，臨床療效滿意。李師勤求古訓，匯通中西，并結合自己多年臨床實踐，對便秘一癥有獨到認識。養(yǎng)血活血方是李教授多年臨床經驗的結晶。為進一步驗證養(yǎng)血活血方治療血虛便秘的臨床療效，探討治療機理并結合當前國內外研究進展特設計本課題。本課題主要從以下2個方面進行研究：
　　 第一部分臨床研究目的：驗證養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘的臨床療效。
　　 方法：臨床研究共收集入選病例80例，隨機分成2組，治療組50例，對照組30例。分別給與養(yǎng)血活

7、血方、麻仁軟膠囊口服。療程2周，觀察治療前后癥狀積分變化。
　　 結果：經臨床觀察進一步證實養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘，療效確切，效果優(yōu)于對照藥物麻仁軟膠囊。2組藥物治療便秘均有一定效果，但養(yǎng)血活血方治療血虛型便秘其痊愈與顯效率明顯高于對照組，養(yǎng)血活血方治療后患者排便情況積分及中醫(yī)證候積分下降程度均優(yōu)于對照組，且隨訪發(fā)現(xiàn)服用養(yǎng)血活血方患者，一般感覺良好，無大便溏瀉、腹部不適等副作用。
　　 第二部分實驗研究實驗一：血虛型功

8、能性便秘小鼠模型的制備目的：復制血虛型功能性便秘小鼠模型方法：綜合國內外文獻報道，結合前期實驗研究，采用小鼠皮下注射鹽酸嗎啡的方法復制便秘模型小鼠，并結合小鼠斷尾放血法制造血虛模型。皮下注射嗎啡2.5mg/kg/d，共45天，對照組給予等體積等滲生理鹽水。
　　 結果：模型組小鼠表現(xiàn)精神萎靡，倦臥少動嗜睡，毛聳無華，眼睛淡白無神，鼻唇淡白失澤；活動減少等一系列符合中醫(yī)血虛證候的表現(xiàn)，且每日平均糞便量明顯減少，便出糞球粘滯，便后不

9、易脫落，部分排出糞塊變大，基本符合便秘特點。
　　 實驗二：養(yǎng)血活血方對血虛型便秘模型小鼠結腸cajal間質細胞的影響目的：探討?zhàn)B血活血方治療血虛型功能性便秘的機理方法：造模成功小鼠按照既定分組，分別給予灌胃養(yǎng)血活血方大、中、小劑量濃縮水煎劑，麻仁軟膠囊，莫沙比利?？瞻捉M、模型組給予等體積生理鹽水灌胃。共計2周。末次給藥后，處死動物，打開腹腔，分離大腸，取距離肛門約1cm遠端結腸腸段2段，于0.9％生理鹽水中沖洗干凈，分別置于福

10、爾馬林液中固定及液氮罐中冷凍保存待用。采用免疫組化技術及激光共聚焦顯微鏡掃描觀察各組小鼠結腸Cajal間質細胞（InterstitialcellsofCajalICC）的變化。
　　 結果：慢性功能性便秘模型小鼠存在結腸ICC的異常，便秘模型小鼠結腸ICC數(shù)量明顯減少，并有形態(tài)異常，與空白組小鼠比較ICC連接網絡欠完整。養(yǎng)血活血方灌胃14天后小鼠結腸ICC數(shù)量有明顯升高。西藥莫沙必利對便秘模型小鼠結腸ICC有一定影響，但未見統(tǒng)計

11、學差異，麻仁軟膠囊能夠提高ICC數(shù)量，但與養(yǎng)血活血方大、中劑量比較存在明顯差異。養(yǎng)血活血方中劑量能夠明顯增加便秘模型小鼠結腸ICC的數(shù)量，且對ICC數(shù)量的影響存在量效關系，大劑量養(yǎng)血活血方對ICC數(shù)量的改善更加明顯，幾乎接近空白組小鼠結腸ICC的數(shù)量。
　　 實驗三：養(yǎng)血活血方對慢性便秘模型小鼠結腸c-kit蛋白表達的影響目的：從分子水平探討?zhàn)B血活血方治療血虛型功能性便秘的機理方法：取液氮冷凍保存的便秘模型小鼠結腸組織，利用we