應用代謝組學策略研究普洱茶及其對人體代謝的影響.pdf

1、普洱茶一般指以符合普洱茶產地環(huán)境條件的云南大葉種曬青茶[Camellia sinensis(Linn.) var. assamica(Masters) Kitamura]為原料,經特殊后發(fā)酵加工工藝生產而成的具有特定品質特征的茶葉。普洱茶具有干茶色澤褐紅、條索肥壯重實、耐貯耐泡,茶湯紅濃明亮、陳香顯著、滋味濃醇回甘,葉底褐色柔軟的特點。普洱茶被認為具有消食減肥、降血脂等保健功能。隨著這些保健功能被現代科學證實,普洱茶日益受到現代人青睞,

2、除了我國、東南亞等有飲用普洱茶傳統(tǒng)的地區(qū),韓國、日本、德國、法國等國家對普洱茶的消費量也不斷增加。目前對普洱茶的研究工作大多是圍繞其化學成分的提取分離、微生物學過程,及其對某一藥理動物模型的作用進行的,而對普洱茶的整體化學特征及其對人體的系統(tǒng)性作用的研究不足?，F有研究沒有涉及普洱茶與其它茶葉種類的化學成分區(qū)別,以及決定普洱茶品質、功效、口感與視覺的成分,造成其功效評價缺乏堅實的理論基礎;另一方面,機體在攝入普洱茶后產生的效應也是一個系統(tǒng)

3、反應,涉及到生物體的各個生理過程,影響眾多代謝通路,僅依靠幾個指標遠不能反映其全貌?；谏鲜鰡栴},我們希望采用一種連續(xù)動態(tài)的系統(tǒng)性研究方法來評價普洱茶的內在品質,探討其與其它茶類的區(qū)別,并評價其對人體代謝的整體效應。代謝組學又稱代謝物組學,是研究機體代謝產物譜變化的一種新的系統(tǒng)方法。作為一種“組學”科學,它借助高通量、高靈敏度與高精確度的現代分析技術,分析細胞、組織和其它生物樣本如血液或尿液中內源性代謝物整體組成并通過其復雜的、動態(tài)的變

4、化來辯識和解析被研究對象的生理病理狀態(tài)。代謝物組是蛋白質組、轉錄組和基因組總體表達的結果,直接反映組織的生化狀態(tài),能夠較靈敏地刻畫生命體生理病理狀態(tài)的變化,對于闡明生命復雜系統(tǒng)具有極為重要的意義。其最主要的特征就是高通量的實驗和大規(guī)模的計算,從系統(tǒng)生物學的角度出發(fā),全面地綜合地考察機體代謝的變化。因此本論文建立了代謝組學方法評價和研究普洱茶及其對人體代謝的影響,主要內容如下:1.建立快速、高效的UPLC/Q-TOF-MS分析方法測定不同

5、種類茶葉,以及不同品種、產地、年份的普洱茶的整體化學成分。經過優(yōu)化液相及質譜的測定條件,本分析方法的專屬性、線性范圍、回收率、日內日間精密度和穩(wěn)定性均符合茶類樣本的測定要求。采用該方法測定了綠茶、紅茶及普洱茶,結合多、單維數據分析后發(fā)現普洱茶的化學成分與紅茶、綠茶有顯著差異,不同品種、產地、年份的普洱茶的化學成分有顯著差異。2.建立普洱茶對人體代謝影響的代謝組學評價方法,采用UPLC/Q-TOF-MS測定健康志愿者飲用普洱茶前后的尿樣,

6、得到尿中小分子代謝物的指紋圖譜,結合模式識別(PCA和PLS-DA)等多維統(tǒng)計分析方法,峰響應信號的主成分分析圖上顯示飲用普洱茶前后健康志愿者尿液內源性代謝物產生明顯分離,并持續(xù)到停止飲用兩周后。采用多維與單維統(tǒng)計結合的方法,找到與飲用普洱茶前后分組相關的物質,發(fā)現其中部分代謝物如肌糖、肉豆蔻酸、5-羥色氨、4-甲氧基苯酸、肌氨酸酐、3-氯酪氨酸、酪氨等物質的相對含量產生顯著變化。從這些變化可推測機體系統(tǒng)對普洱茶化學成分的應答以及攝入普