食管鱗癌染色體畸變研究及候選擴(kuò)增癌基因的鑒定.pdf

1、食管癌的死亡率在我國(guó)惡性腫瘤中居第四位，鱗狀細(xì)胞癌是我國(guó)食管癌的主要病理類(lèi)型，總體五年生存率僅約10％。為鑒定與食管癌關(guān)系密切的基因，本研究從染色體畸變的角度出發(fā)，在實(shí)驗(yàn)室前期工作及相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，統(tǒng)計(jì)分析食管癌染色體畸變譜，發(fā)現(xiàn)3、5、8號(hào)染色體重排及著絲粒斷裂再重組可能是最常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)改變，3q、8q增益是最常見(jiàn)的數(shù)目異常。 本研究首先選擇食管癌中結(jié)構(gòu)改變較多、擴(kuò)增頻率最高的染色體區(qū)段3q進(jìn)行分析。依據(jù)本課題組前期對(duì)27例標(biāo)

2、本3q24-q29(跨越75Mb)的28個(gè)位點(diǎn)的擴(kuò)增頻率分析，我們繪制了3q26-q27區(qū)段23個(gè)位點(diǎn)擴(kuò)增頻率改變的趨勢(shì)圖。鑒定了3q26.2、3q26.31及3q26.33三個(gè)擴(kuò)增子，在擴(kuò)增子內(nèi)挑選了MDS1，PRKC1，ECT2和PIK3CA四個(gè)候選基因進(jìn)一步分析。 雙色熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)檢測(cè)108例食管鱗癌發(fā)現(xiàn)MDS1，PRKCI，ECT2和PIK

3、3CA的擴(kuò)增率分別是53.5％、53。4％、40.0％和32.3％，MDSl和PRKCI在食管癌組織及細(xì)胞系中均存在共擴(kuò)增的現(xiàn)象，但只有PRKCI基因的擴(kuò)增與浸潤(rùn)深度(P=0.043)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.015)及病理分期(P=0.002)相關(guān)。 定位于3q26.2上的PRKCI(也稱(chēng)為PKCl)基因編碼的蛋白是一種不典型的絲氨酸/蘇氨酸激酶，目前對(duì)其在具體腫瘤中作用的研究還相對(duì)較少，為此我們對(duì)該基因在食管癌中的作用進(jìn)行了深入

4、的研究。對(duì)31例食管癌標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行了FISH檢測(cè)和免疫組織化學(xué)分析，結(jié)果顯示PRKCI擴(kuò)增與過(guò)表達(dá)存在相關(guān)性(P=0.0091，食管鱗癌中PRKCI拷貝數(shù)增加是PRKCI蛋白表達(dá)上調(diào)的重要機(jī)制。食管癌組織微陣列的免疫組化分析發(fā)現(xiàn).PRKCI基因過(guò)表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.002)和腫瘤分期(P=0.004)相關(guān)。多變量統(tǒng)計(jì)分析進(jìn)一步說(shuō)明PRKCI基因是3q26上與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的獨(dú)立因素。 以上結(jié)果提示，染色體3q26上的