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文檔簡介
1、目的:研究紫花牡荊素(Casticin)對人肝癌HepG2細胞增殖抑制和凋亡誘導的作用,并初步探討其作用機制。
方法:用終濃度為(0、0.5、1.0、2.0)μmol/L的紫花牡荊素及10μmol/L5-FU作用于HepG2細胞,其中0μmol/L紫花牡荊素為陰性對照組,于12h、24h、48 h后采用MTT法檢測細胞增殖抑制率;作用24 h后收集各組肝癌HepG2細胞,應用Hoechst33342核染色,觀察細胞形態(tài)學變化;
2、應用流式細胞術AV-PI法和DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測肝癌HepG2細胞的凋亡;RT-PCR檢測肝癌HepG2細胞survivin、Bcl-2mRNA表達。
結果:MTT法檢測顯示,終濃度為0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L紫花牡荊素及10μmol/L5-FU處理人肝癌 HepG2細胞48h后,細胞生長抑制率分別為(38.15±1.72)%、(57.67±0.47)%、(71.88±2.04)%、(53.
3、41±1.34)%,并存在時間和濃度依賴關系(P<0.01,P<0.05);紫花牡荊素作用24h后,Hoechst33342染色,可見核染色質凝集,凋亡細胞呈致密濃染,與陰性對照組相比,紫花牡荊素處理后凋亡細胞比例增加;流式細胞術AV-PI法檢測早期凋亡可見隨藥物濃度的增加,細胞凋亡率逐漸增加(P<0.05);DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測肝癌HepG2細胞凋亡,顯示有特征性的DNA梯度條帶形成,說明DNA斷裂,細胞凋亡;RT-PCR結果顯示
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