輻射誘發(fā)的K562細胞增殖抑制、凋亡和Egr-1基因表達的研究.pdf

1、該課題以人紅白血病細胞K562為靶細胞,觀察了<'60>Coγ射線所致的腫瘤細胞增殖抑制、分化和凋亡情況,同時分析了照后早期生長反應基因Egr-1的轉(zhuǎn)錄水平的變化.初步探討了<'60>Coγ射線誘發(fā)的k562細胞增殖抑制的可能的內(nèi)在機制.(1)應用不同受照劑量的細胞增殖曲線和<'3>H-TdR摻入法測定增殖抑制率來觀察K562細胞對<'60>Coγ射線的敏感程度.結(jié)果發(fā)現(xiàn),細胞增殖抑制的發(fā)生具有一定的時間性,且表現(xiàn)出明顯的劑量信賴性(p

2、<0.01).對細胞的Giemsa染色發(fā)現(xiàn),照射前后k562細胞的形態(tài)和染色特點發(fā)生了明顯的變化,具備了某些較高分化程度紅細胞的特點.對k562細胞平均細胞內(nèi)總蛋白的測定結(jié)果表明,照后數(shù)天內(nèi)照射組的平均細胞內(nèi)總蛋白明顯高于對照組.現(xiàn)有的文獻表明照后細胞內(nèi)總蛋白升高中k562細胞發(fā)生分化的一個重要特點.(2)應用基于線粒體膜電位變化而表征細胞凋亡的試劑盒測定了不同劑量所致的凋亡和受照后不同時間的細胞凋亡變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn),在觀察的劑量和樣本范

3、圍內(nèi),受照劑量大小與凋亡細胞的比例未見有差別,而照后6h處凋亡細胞比例較高.(3)應用RT-PCR法擴增了Egr-1基因編碼區(qū)的一個片段,以此來觀察這個與細胞分化和凋亡密切相關的基因的轉(zhuǎn)錄水平變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn),在照后的0.5h到1h,Egr-1的轉(zhuǎn)錄水平迅速升至最高,此后迅速下降,到8h下降到低于正常水平.研究結(jié)果表明,<'60>Coγ射線誘導的K562細胞增殖抑制表現(xiàn)出劑量依賴性的特點,<'60>Coγ射線所致的k562細胞增殖抑制可能