RNA干擾對胃癌MGC803細胞CDX2基因表達及其生物學行為的研究.pdf

1、目的：探討小分子干擾RNA(siRNA)對胃癌MGC803細胞CDX2基因表達及其生物學行為的影響。 方法：用LipofectamineTM2000把negative control-siRNA(陰性對照組)和CDX2-siRNA(實驗組)轉(zhuǎn)染MGC803細胞，轉(zhuǎn)染48h后，采用實時定量PCR及蛋白印跡技術(shù)分別檢測CDX2 mRNA及蛋白的表達。四唑鹽(MTT)法和克隆實驗檢測MGC803細胞增殖的變化；應(yīng)用體外侵襲實驗及遷移實

2、驗和劃痕實驗分別檢測CDX2-siRNA對胃癌MGC803細胞侵襲力和遷移能力的影響。流式細胞儀檢測MGC803細胞周期和細胞凋亡變化。 結(jié)果：陰性對照siRNA和CDX2-siRNA和由脂質(zhì)體介導成功轉(zhuǎn)染胃癌MGC803細胞，CDX2-siRNA有效抑制了胃癌細胞CDX2 mRNA的表達，與陰性對照組及未轉(zhuǎn)染組細胞比較分別降低了87.59％和88.91％(P<0.05)；CDX2-siRNA抑制胃癌MGC803細胞CDX2蛋白

3、的表達，與陰性對照組及未轉(zhuǎn)染組細胞比較降低了70.85％和79.3％。CDX2-siRNA抑制MGC803細胞的增殖，與陰性對照組和未轉(zhuǎn)染組比較增殖分別抑制了75.2％和85.8％，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)； CDX2siRNA促使更多MGC803細胞DNA含量聚集于G0/G1期附近，G0/G1期DNA含量比例為(72.38±1.76)％，與陰性對照組(56.67±0.83)％和未轉(zhuǎn)染組(59.18±1.24)％比較，差異有統(tǒng)計

4、學意義(P<0.05)。實驗組細胞凋亡率(12.53±0.63)％，與與陰性對照組(4.46±0.73)％和未轉(zhuǎn)染組(5.42±0.32)％比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。同時，細胞體外侵襲力及遷移能力相應(yīng)減弱(P<0.05)。 結(jié)論：CDX2-siRNA能有效抑制人胃癌MGC803細胞CDX2mRNA及蛋白的表達，使細胞凋亡增加，使S期細胞的DNA含量下調(diào)，同時顯示細胞分裂停滯在G0/G1期附近，進而抑制其增殖，并在一