丁香苷的抗炎免疫作用及部分機制研究.pdf

1、炎癥是感染及許多疾病最基本的病理過程。臨床上常用的抗炎藥物主要有非甾體抗炎藥和甾體抗炎藥，其臨床療效顯著，但副作用頻見報道。炎癥和免疫在組織、細胞、分子水平上是緊密聯(lián)系不可分割的過程，故單獨應用抗炎藥或免疫抑制藥或免疫增強藥治療慢性炎癥性疾病療效均不理想。因此，尋找低毒高效的新型抗炎免疫調(diào)節(jié)藥一直是藥物研究的一個重要領(lǐng)域。丁香苷(Syringin)是從刺五加根莖中提取分離得到的一種典型的酚苷類化合物，也是祖師麻、救必應、天女木蘭、關(guān)東丁

2、香等中藥的主要成分，是藥材及其制劑含量測定的指標成分之一。從其化學結(jié)構(gòu)分析，丁香苷的苷元為芥子醇，其衍生物屬于苯丙醇類物質(zhì)，具有抗氧化活性。目前丁香苷的研究多集中在含量測定方法的建立上，而對其生物活性的研究還較少。
　　 本課題采用多種急、慢性炎癥和免疫性炎癥模型，以及機體免疫藥理實驗，研究丁香苷(Syringin)抗炎免疫作用并探討其部分作用機制。實驗分為三個部分：
　　 1、丁香苷抗炎作用及部分機制研究
　　

3、 以阿司匹林作陽性對照藥，觀察丁香苷對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠毛細血管通透性增加、角叉菜膠致大鼠足趾腫脹、棉球致大鼠肉芽腫的抗炎作用；同時測定角叉菜膠致大鼠炎足炎性滲出物中的PGE2、MDA和血清中的NO、SOD，初步探討丁香苷抗炎的部分機制。結(jié)果表明，丁香苷對急慢性炎癥反應有明顯抑制作用，能明顯降低角叉菜膠致炎足炎性滲出物中PGE2、MDA和血清中NO含量，明顯提高血清中SOD的活性。因此，丁香苷具有較強的抗炎作用，其機制可能

4、與抑制PGE2、NO等炎癥介質(zhì)生成、增強自由基清除能力有關(guān)。
　　 2、丁香苷的免疫調(diào)節(jié)作用
　　 腹腔注射環(huán)磷酰胺復制免疫功能低下的動物模型。采用碳廓清實驗測定單核巨噬細胞吞噬功能；血清溶血素抗體生成實驗、脾細胞溶血素生成實驗測定體液免疫功能；MTT法檢測刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)誘導的脾淋巴細胞增殖反應，二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene，DNFB)誘導遲發(fā)型變態(tài)反應(delayed-t

5、ypehypersensitivity，DTH)實驗模型測定細胞免疫功能。結(jié)果表明，丁香苷可提高免疫低下小鼠的碳廓清指數(shù)K值，提高免疫低下小鼠巨噬細胞吞噬功能。丁香苷可提高免疫功能低下小鼠血清中和脾細胞溶血素水平，提高免疫低下小鼠的體液免疫功能。丁香苷可提高免疫低下小鼠的脾淋巴細胞增殖反應，拮抗免疫低下小鼠耳腫脹度的減輕，使其接近正常水平，提高免疫低下小鼠的細胞免疫功能。這些結(jié)果提示丁香苷通過提高免疫低下小鼠非特異性免疫、體液免疫和細胞

6、免疫，而增強免疫低下小鼠的免疫功能。
　　 3、丁香苷對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的治療作用及機制
　　 采用大鼠足跖皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑誘發(fā)大鼠AA模型。足容積法測量繼發(fā)側(cè)足腫脹度，進行疼痛評分和多發(fā)性關(guān)節(jié)炎評分，MTT法檢測刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)誘導的脾淋巴細胞增殖反應，酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)測定刀豆蛋白(ConA)誘導的脾淋巴細胞產(chǎn)生IL-2的水平以及脂多糖(LPS)誘導的腹腔巨噬細胞(PMΦ)產(chǎn)生

7、IL-1β和TNF-α的水平。結(jié)果表明，大鼠致炎后第14天，繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎出現(xiàn)，同時灌胃給予不同劑量的丁香苷及陽性對照藥雷公藤多苷，連續(xù)給藥16天。丁香苷劑量組于第22天開始不同程度降低AA大鼠繼發(fā)側(cè)關(guān)節(jié)腫脹度、關(guān)節(jié)疼痛評分、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)；同時各劑量組可不同程度地提高AA大鼠低下的脾淋巴細胞增殖反應和脾細胞IL-2的產(chǎn)生，降低AA大鼠PMΦ產(chǎn)生過高的IL-1β和TNF-α。這些結(jié)果提示丁香苷改善AA大鼠異常的細胞免疫功能，調(diào)節(jié)細胞因子