新型可注射、可降解磷酸鈣骨水泥的生物相容性研究.pdf

1、目的：從急性毒性、熱原、溶血、遲發(fā)型超敏、體內(nèi)哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核、短期肌肉內(nèi)埋植、體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等對(duì)新型可注射、可降解磷酸鈣骨水泥的生物安全性進(jìn)行較全面的評(píng)價(jià)。
　　 方法：①在急性全身毒性實(shí)驗(yàn)中，將供試品通過尾靜脈注射給予昆明小鼠，在注射后即刻、4、24、48、72小時(shí)觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組昆明鼠的一般狀態(tài)、毒性表現(xiàn)和死亡動(dòng)物數(shù)，以及72小時(shí)后的動(dòng)物體重；②在熱原實(shí)驗(yàn)中，將一定劑量供試品經(jīng)耳緣靜脈注入新西蘭兔體內(nèi)，觀察3只實(shí)驗(yàn)用

2、兔的體溫升高情況；③在溶血實(shí)驗(yàn)中，將新鮮制備的抗凝兔血加入供試品中，觀察各組是否出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，并測(cè)其吸光度；④在遲發(fā)型超敏實(shí)驗(yàn)中，受試動(dòng)物經(jīng)供試品的兩步誘導(dǎo)和激發(fā)后，觀察激發(fā)部位皮膚情況；⑤在微核實(shí)驗(yàn)中，將受試品通過腹腔注射給予受試動(dòng)物，取其雙側(cè)股骨內(nèi)骨髓，制備涂片，油鏡觀察，計(jì)算各組PCES占紅細(xì)胞總數(shù)的比值，用作骨髓毒性的指示，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較其遺傳毒性；⑥在短期肌肉內(nèi)埋植(植入后局部反應(yīng))實(shí)驗(yàn)中，將測(cè)試樣品無菌植入受試動(dòng)物背部肌肉

3、中，在植入后1、4、12周時(shí)進(jìn)行植入部位組織實(shí)驗(yàn)室觀察和病理解剖，并對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行分析；⑦在體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，將供試品與特定細(xì)胞系接觸，用MTT法測(cè)定細(xì)胞相對(duì)增殖率，評(píng)價(jià)其對(duì)細(xì)胞的毒性作用和程度。
　　 結(jié)果：①在急性毒性實(shí)驗(yàn)中，注射后所有動(dòng)物于各觀察時(shí)間點(diǎn)均沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物癥狀和體重的變化都在可接受的范圍之內(nèi)，可以認(rèn)為新型骨水泥無急性全身毒性作用。②熱原實(shí)驗(yàn)中，3只家兔的體溫升高均低于0.6℃，且3只家兔的升溫總

4、和低于1.4℃，可以認(rèn)為新型骨水泥沒有致熱性。③溶血實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照管中觀察到溶血現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)品和陰性對(duì)照管中未見溶血現(xiàn)象。測(cè)各組吸光度，得到實(shí)驗(yàn)組溶血率為0.47％，小于5％，表明新型骨水泥沒有引起溶血反應(yīng)。④遲發(fā)型超敏實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的紅斑和水腫記分等級(jí)均為0，故新型骨水泥無潛在皮膚致敏性。⑤微核實(shí)驗(yàn)中，各組PCEs占紅細(xì)胞總數(shù)的比值的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，計(jì)算各組MPCEs在PCEs中所占的數(shù)量，陽(yáng)性對(duì)照的雌雄兩組與樣品組雌雄兩組

5、的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，陰性對(duì)照與樣品組的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明，被測(cè)樣品浸提液不會(huì)對(duì)小鼠產(chǎn)生遺傳毒性。⑥在短期肌肉內(nèi)埋植實(shí)驗(yàn)中，材料被植入后未見周圍組織明顯壞死，1周時(shí)有輕度炎癥反應(yīng)，隨時(shí)間推移，炎癥反應(yīng)逐漸消退，并出現(xiàn)纖維包裹。結(jié)果表明，新型骨水泥在局部植入后有良好的組織相容性。⑦體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比無明顯形態(tài)差異。定量測(cè)試結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)品毒性為0～1級(jí)，定量測(cè)試和定性測(cè)試的結(jié)果均表明，新型磷酸鈣骨水泥無明