銅綠假單胞菌ampC基因分布和產(chǎn)酶狀況對(duì)藥物敏感性的影響.pdf

1、抗生素的濫用或使用不當(dāng)導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的日益嚴(yán)重是臨床抗感染治療領(lǐng)域域面臨的世界性難題。解決這一問題的方法之一是根據(jù)所感染細(xì)菌的種類及其耐藥性有針對(duì)性地使用抗生素。目前對(duì)細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)仍然依賴傳統(tǒng)的藥敏實(shí)驗(yàn)，其最大的缺點(diǎn)是細(xì)菌培養(yǎng)周期長(zhǎng)，臨床醫(yī)生無(wú)法在感染早期對(duì)患者合理用藥。通過PCR技術(shù)直接檢測(cè)細(xì)菌耐藥基因，可以快速確定細(xì)菌種類并分析可能具有的耐藥性，為合理使用抗生素提供依據(jù)。銅綠假單胞菌是目前各臨床ICU常見的致病菌，其治療主要依賴

2、β-內(nèi)酰胺類抗生素。銅綠假單胞菌耐受β-內(nèi)酰胺類抗生素主要由細(xì)菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶引起。β-內(nèi)酰胺酶種類繁多，其中較為重要的包括AmpC酶、ESBLs等。AmpC酶屬于Bush分類中的Ⅰ類酶或Ambler C類酶，其編碼基因是ampC。不同種屬的細(xì)菌的ampC基因序列顯著不同。 目的:分析南京軍區(qū)南京總醫(yī)院呼吸內(nèi)科ICU病房分離鑒定的銅綠假單胞菌中ampC耐藥結(jié)構(gòu)基因的分布與耐藥狀況的關(guān)系；分析產(chǎn)AmpC酶與與耐藥狀況的關(guān)系；在

3、此基礎(chǔ)上分析ampC耐藥結(jié)構(gòu)基因與產(chǎn)AmpC酶建立起的雙重檢測(cè)方法對(duì)指導(dǎo)臨床銅綠假單胞菌感染抗生素用藥的意義。 方法: 1、標(biāo)本菌株收集來(lái)源于南京軍區(qū)南京總醫(yī)院呼吸科ICU病房2004年2月至2006年2月臨床分離的147株銅綠假單胞菌。 2、用PCR檢測(cè)147株銅綠假單胞菌中ampC基因的分布。 3、應(yīng)用頭孢西丁三維實(shí)驗(yàn)的方法檢測(cè)細(xì)菌產(chǎn)AmpC酶的狀況。 4、應(yīng)用紙片擴(kuò)散法鑒定細(xì)菌的耐藥性。

4、 5、運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析ampC基因的分布以及產(chǎn)AmpC酶的狀況對(duì)細(xì)菌耐藥性的影響。 結(jié)果: 1、在147株銅綠假單胞菌中，PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：有107株ampC基因陽(yáng)性，陽(yáng)性率為72.8％：部分PCR陽(yáng)性產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與GeneBank序列（AE004827）一致，同源性為100％。 2、ampC基因陰性菌株依次對(duì)亞胺培南、頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感，敏感率依次為95.0％、92

5、.5％、90.0％、90.0％；ampC基因陽(yáng)性菌株依次對(duì)亞胺培南、頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感，敏感率依次為95.3％、75.7％、74.8％、73.0％。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示：ampC基因陽(yáng)性菌株對(duì)頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感率明顯降低（P<0.05）。 3、147株銅綠假單胞菌中88株產(chǎn)AmpC酶，陽(yáng)性率為59.9％。另外，40株ampC基因陰性菌株中有3株產(chǎn)AmpC酶，可能以質(zhì)粒介導(dǎo)方式產(chǎn)AmpC酶

6、。 4、不產(chǎn)AmpC酶菌株依次對(duì)亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟敏感，敏感率依次為100％、94.9％、93.2％、91.5％；產(chǎn)AmpC酶菌株依次對(duì)亞胺培南、頭孢吡肟、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦敏感，敏感率依次為92.0％、81.8％、71.6％、62.5％。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示：產(chǎn)AmpC酶菌株對(duì)亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南及頭孢呋辛敏感率明顯降低（P<0.05）。 5、ampC