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文檔簡介
1、目的:觀察補體C3對體外培養(yǎng)神經(jīng)元突起生長的影響,并進一步對其作用機制進行初步分析。 方法:在原代皮層神經(jīng)元培養(yǎng)液中中分別加入不同濃度的外源性補體蛋白C3、C3活性片段C3a,WST–8法檢測其對神經(jīng)元的活力影響,觀察C3及C3a對神經(jīng)元突起生長的影響;神經(jīng)元培養(yǎng)液中加入C3a受體(C3aR)抑制劑SB290157后,再分別加入補體C3、C3a觀察神經(jīng)元突起生長的變化。Image J圖像分析軟件采集各實驗組每個大腦皮層神經(jīng)元最長
2、突起長度??瞻着囵B(yǎng)液和培養(yǎng)液中加入其它試劑的神經(jīng)元作為對照組。 結(jié)果:培養(yǎng)液中分別加入一定濃度范圍內(nèi)的補體C3后的神經(jīng)元活性均不受影響;同一培養(yǎng)時間內(nèi)培養(yǎng)液中加入特定濃度的C3、C3a的神經(jīng)元突起均較正常對照組顯著增長;而神經(jīng)元培養(yǎng)液中加入C3a受體抑制劑SB290157后再加入相應(yīng)濃度的C3、C3a,其同一培養(yǎng)時間內(nèi)C3、C3a實驗組神經(jīng)突長度與正常對照組均無明顯差異。 結(jié)論:低濃度補體C3對體外培養(yǎng)原代神經(jīng)元神經(jīng)突起
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