肺癌和前列腺癌骨轉移血清蛋白質組學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分肺癌骨轉移血清蛋白質組學研究 目的:應用蛋白質組學雙向熒光差異凝膠電泳和質譜技術尋找并鑒定肺癌骨轉移患者與對照組肺癌無骨轉移患者血清之間的差異表達蛋白,探討肺癌骨轉移患者血清中可能與肺癌骨轉移發(fā)生、發(fā)展相關的蛋白質,以期尋找肺癌骨轉移血清標志物。 方法:收集男性肺癌伴骨轉移、不伴骨轉移各12例,女性肺癌伴骨轉移、不伴骨轉移各12例血清樣本。同組血清等量混合,用除白蛋白試劑盒除去血清中的白蛋白,再經除鹽濃縮后,將4

2、組處理后的血清樣品用不同的CyDye染料交叉標記后進行雙向熒光差異凝膠電泳(2-D DIGE)。利用DeCyder軟件分析,將肺癌伴骨轉移與肺癌無骨轉移比較的差異蛋白質點行基質輔助激光解析離子化飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)鑒定。 結果:雙向熒光差異凝膠電泳顯示,肺癌骨轉移組血清蛋白中有16個斑點與肺癌無骨轉移組有顯著差異。肺癌骨轉移患者血清中11個蛋白質表達水平顯著增加,5個蛋白質表達水平顯著下降。5個差異蛋白點進行

3、膠內原位酶解、肽質指紋圖譜分析,成功得到了個4蛋白質肽質指紋圖,并查詢數(shù)據(jù)庫初步鑒定了該4個蛋白質分別為RBP-TTR、結合珠蛋白(Hp)、S-亞硝基血紅蛋白(SNO- Hb)、desArg141 alpha Hb。 結論:雙向熒光差異凝膠電泳結合質譜鑒定是血清差異蛋白質組學研究的可靠平臺和有力工具。所鑒定出的蛋白質可能與肺癌骨轉移的發(fā)生、發(fā)展有關,有助于肺癌骨轉移發(fā)病機理的了解。 第二部分前列腺癌骨轉移血清蛋白質組學研

4、究 目的:應用蛋白質組學雙向凝膠電泳和質譜技術尋找并鑒定前列腺癌骨轉移患者與對照組前列腺癌無骨轉移患者血清之間的差異表達蛋白,探討前列腺癌骨轉移患者血清中可能與前列腺癌骨轉移發(fā)生、發(fā)展相關的蛋白質,以期尋找前列腺癌骨轉移血清標志物。 方法:收集前列腺癌伴骨轉移、不伴骨轉移各5例血清樣本。血清樣品用除白蛋白試劑盒除去血清中的白蛋白后進行雙向凝膠電泳,ImageMaster 2D Platinum軟件分析,有意義的差異蛋白質

5、點行基質輔助激光解析離子化飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)鑒定。 結果:雙向凝膠電泳顯示,前列腺癌骨轉移組血清蛋白中有15個斑點與前列腺癌無骨轉移組有顯著差異。前列腺癌骨轉移患者血清中10個蛋白質表達水平顯著增加,5個蛋白質表達水平顯著下降。5個差異蛋白點進行膠內原位酶解,肽質量指紋圖譜分析成功得到了3個蛋白質肽質量指紋圖譜,并查詢數(shù)據(jù)庫初步鑒定了該3個蛋白質分別為鋅a2糖蛋白、結合珠蛋白和載脂蛋白CⅢ。 結論:

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